實驗匯總

1、實驗匯總實驗匯總本科生本科生:1.1.總糖含量測定（斐林試劑）總糖含量測定（斐林試劑）1.1步驟總糖含量的測定包括還原糖和轉(zhuǎn)化糖含量的測定。還原糖的測定：用移液管移取提取液10mL，轉(zhuǎn)入100mL錐形瓶，用蒸餾水定容后裝入酸式滴定管，然后用移液管移取斐林液A、B各5mL于250mL錐形瓶，搖勻后加蒸餾水約30mL，在電爐上煮至沸騰，繼續(xù)保持溶液沸騰，用樣品液滴至藍(lán)色大部分褪去后加2滴亞甲基藍(lán)，繼續(xù)滴至溶液轉(zhuǎn)為磚紅色，記錄樣品液滴定值（m

2、L），重復(fù)3次。轉(zhuǎn)化糖的測定：用移液管取提取液10mL，轉(zhuǎn)入100mL錐形瓶，加6molL的HCL5mL，于沸水浴上水解15分鐘，溶液冷卻后，用NaOH中和（先用6molL的NaOH約5mL，再滴加0.56molL的NaOH），滴入2滴酚酞指示，加NaOH至溶液顯紅色即為終點，此為轉(zhuǎn)化糖待測液，定容至100mL，將轉(zhuǎn)化糖裝入酸式滴定管，用以滴定斐林液，方法同還原糖測定，記錄樣品滴定值（mL），重復(fù)3次。1.2結(jié)果計算還原糖（g100mL

3、）=D1000V1轉(zhuǎn)化糖（g100mL）=D1000V2，蔗糖含量（g100mL）=（轉(zhuǎn)化糖含量還原糖含量）0.95，總糖含量(g100mL)=還原糖含量蔗糖含量。（其中D：10mL斐林液相當(dāng)?shù)钠咸烟橇縢，V1：還原糖滴定值（mL），V2：轉(zhuǎn)化糖滴定值（mL））2.Vc2.Vc含量測定含量測定(2(2，66二氯靛酚滴定法二氯靛酚滴定法)2.1步驟用移液管移取提取液5mL，用1%草酸稀釋，定容至50mL，用移液管移取稀釋液5mL至50mL

4、錐形瓶，通過半微量滴定管滴入2，6二氯靛酚，直至溶液呈粉紅色30秒內(nèi)不消失，記錄2，6二氯靛酚用量（mL），重復(fù)3次。2.2結(jié)果計算維生素C含量(mg100mL)=VAC100B(其中V：2，6二氯靛酚用量（mL），A：每毫升2，6二氯靛酚相當(dāng)?shù)木S生素C的量，C：樣品稀釋倍數(shù)，B：滴定用樣品量（mL）)4.2結(jié)果計算總酸含量（g100mL）=VN0.067100B(其中V：NaOH滴定值（mL），N：NaOH的濃度（molL），B：滴定

5、用樣品量（mL），0.067：蘋果酸折算系數(shù))5葉片中葉綠素含量測定葉片中葉綠素含量測定5.1步驟稱取植物鮮葉0.50g（可視葉片葉綠素含量增減用量），剪碎放入研缽中，加少量碳酸鈣粉和石英砂及80﹪丙酮充分研成勻漿，過濾，濾液入25ml容量瓶中，用80﹪丙酮反復(fù)洗滌殘渣至濾紙無綠色，合并濾液，定容，搖勻，即得葉綠素提取液。取上述提取液1ml稀釋至10ml，搖勻。以80%丙酮為參比液，在663，645nm波長下測定吸光度值。5.2結(jié)果計算

6、Chla含量（mgg）=(12.7OD6632.69OD645)VW1000Chlb含量（mgg）=(22.9OD6454.68OD663)VW1000Chl含量（mgg）=(20.2OD6458.02OD663)VW10006過氧化物酶的測定（愈傷木酚法）過氧化物酶的測定（愈傷木酚法）6.1步驟稱取樣品1g，加入20mmolLKH2PO4溶液5ml，于研缽中研磨成勻漿，在3000rmin下離心10min，上清液轉(zhuǎn)入25ml容量瓶中，殘

7、渣再用5mlKH2PO4溶液提取一次，合并兩次上清液，定容，混勻，貯于冰箱中備用。取比色杯2只，于1只中加入已混勻的反應(yīng)混合液3ml，KH2PO4溶液1ml，作參比液，另一只加入反應(yīng)混合液3ml，酶液1ml（若濃度過高則需稀釋后再加），立即記時并置于分光光度計中，470nm下測定光密度，每隔1min測定一次，連續(xù)測30min，每次測定前重新用對照校準(zhǔn)。6.2結(jié)果計算以每minA470變化0.01為1個過氧化物酶活力單位（u），計算其活力