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文檔簡介
1、HSABNU北京師范大學附屬中學高中生物總復習120182018年高考生物實驗歸納匯總年高考生物實驗歸納匯總實驗一:實驗一:檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)一、實驗目的:一、實驗目的:嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì),闡明實驗原理—顏色反應,識記和區(qū)分用于可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定的試劑及產(chǎn)生的特定顏色,初步掌握鑒定上述化合物的基本方法,學會描述實驗現(xiàn)象,掌握NaOH溶液和CuSO4
2、溶液的使用方法。二、實驗原理:二、實驗原理:某些化學試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應。1、生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多,有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內(nèi)都含有游離的具還原性的半縮醛羥基,因此叫做還原糖還原糖;蔗糖分子內(nèi)沒有,為非還原糖。實驗中所用的斐林試劑,只能鑒定生物組織中可溶性還原糖,而不能鑒定可溶性非還原糖。可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉
3、淀。如:葡萄糖葡萄糖2Cu2Cu224OH4OH—加熱加熱葡萄糖酸葡萄糖酸CuCu2O↓O↓(磚紅色)(磚紅色)H2O即Cu2被還原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液變化過程為:淺藍色淺藍色→棕色棕色→磚紅色沉淀磚紅色沉淀淀粉遇碘變藍色(直鏈)藍色(直鏈)或紫(紅)色(支鏈)紫(紅)色(支鏈)。2、脂肪和類脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)統(tǒng)稱為脂類。它是構(gòu)成人體組織的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂
4、溶劑中。在化學組成上,脂類屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關(guān)的物質(zhì)。脂類的主要功能是氧化供能。脂肪主要存積于脂肪組織中,并以油滴狀的微粒存在脂肪細胞漿內(nèi)。在病理檢驗中,脂類染色法最常用以證明脂肪變性,脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類染色使用最廣泛的染料是蘇丹染料,最常用的有蘇丹Ⅲ,蘇丹Ⅳ,蘇丹黑及油紅O等。脂肪被染色,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色。經(jīng)研究認為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時,對蘇丹染料著色效果最好。根據(jù)這一原理,適當提
5、高溫度(37℃60℃)對組織切片染色效果是有好處的。HSABNU北京師范大學附屬中學高中生物總復習31斐林試劑斐林試劑(包括甲液:質(zhì)量濃度為0.1gmLNaOH溶液和乙液:質(zhì)量濃度為0.05gmLCuSO4溶液)2蘇丹蘇丹Ⅲ或蘇丹或蘇丹Ⅳ染液染液3雙縮脲試劑雙縮脲試劑(包括A液:質(zhì)量濃度為0.1gmLNaOH溶液和B液:質(zhì)量濃度為0.01gmLCuSO4溶液)4體積分數(shù)為體積分數(shù)為50%50%的酒精溶液的酒精溶液5碘液碘液6蒸餾水蒸餾水
6、六、方法步驟:六、方法步驟:一、可溶性糖的鑒定操作方法注意問題解釋1.制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過濾)蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的顏色掩蓋。顏色掩蓋。2.取1支試管,向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。3.向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別分別配制、儲存,使用前使用前才將甲、乙液等量混勻成
7、斐林試劑;切勿切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時,生成的合保存時,生成的Cu(Cu(OHOH)2在70~70~90900C下分解成黑色下分解成黑色CuOCuO和水;水;甲、乙液分別加入時可能會與組甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應,無織樣液發(fā)生反應,無CuOHCuOH生成。成。4.試管放在盛有50650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,觀察到溶液顏色:淺
8、藍淺藍色→棕色棕色→磚紅色磚紅色(沉(沉淀)淀)最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向?qū)嶒炚?。也可用酒精燈對試管直接加熱。防止試管?nèi)的溶液沖出試管,造防止試管內(nèi)的溶液沖出試管,造成燙傷;成燙傷;縮短實驗時間??s短實驗時間。二、脂肪的鑒定操作方法注意問題解釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的干種子要浸泡3~4小時,新花生的浸泡時因為浸泡時間短,不易切片;浸泡因為浸泡時間短,不易切片;浸泡時間
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