響應曲面法優(yōu)化石榴皮多糖提取條件的研究

1、響應曲面法優(yōu)化桔梗多糖提取條件研究實驗目的：以石榴皮為實驗材料，基于單因素(提取時間、提取溫度、物料比、pH值和NaC1濃度)試驗結果，確定石榴皮多糖提取主要因素，分別為物料比、提取時間和提取溫度。利用響應曲面法對石榴皮多糖的提取條件就行優(yōu)化。實驗原理：石榴皮為石榴科植物石榴的果皮。秋季石榴果實成熟，頂端開裂時采摘，除去種子及隔瓤，切瓣曬干，或微火烘干。干燥的果皮呈不規(guī)則形或半圓形的碎片狀，厚2～3毫米。石榴皮含生物堿等多種生物活性物質

2、，其多糖是有一系列單糖聚合而成的大分子物質，研究表明多糖類物質具有增強人體免疫力及改善糖尿病癥狀的作用。響應曲面法(Responsesurfacemethodology，RSM)是一種優(yōu)化生物過程的統(tǒng)計學試驗設計，采用該法以建立連續(xù)變量曲面模型，對影響生物過程的因子及其交互作用進行評價，確定最佳水平范圍，而且所需要的試驗組數相對較少，可節(jié)省人力物力，因此該方法已經成功應用于各種各樣的生物過程優(yōu)化中。響應曲面法，也稱為回歸設計，這類試驗設

3、計問題需要尋找試驗指標與各因子間的定量規(guī)律（而不是判斷因子的顯著性，找出各因子水平的最佳組合）?；貧w設計是在多元線性回歸的基礎上主動收集數據的方法獲得具有較好性質的回歸方程的一種試驗設計方法。響應曲面回歸模型的出現就是集統(tǒng)計、數學和計算機科學緊密聯(lián)系的結果。由于它考慮的因素很多運算非常繁雜是人工運算所不及的。通過計算機運算可以達到建立模型的目的。由于它建立的是復雜的多維空間曲面較接近實際情況因此響應曲面回歸模型逐漸開始應用。實驗材料與方

4、法：石榴皮（經篩選除雜干燥粉碎后做實驗原料），D葡萄糖，苯酚，濃硫酸，無水乙醇，石油醚，氯仿，正丁醇，丙酮（均為分析純）。分光光度計，離心機，電子天平，電熱恒溫水浴鍋1，多糖的提取稱取干燥的石榴皮粉末5.0g，置于250ml燒瓶中，加80%乙醇100ml，于80℃提一浸次，提取90min，趁熱抽慮，濾渣用80%乙醇洗滌。石榴皮洗滌液于預定的工藝條件下提取石榴皮多糖，提取液離心分離（4000rmin，10min），上清液置于200ml容量

5、瓶中，以蒸餾水定容至刻度并搖勻，準確移取10ml置于50ml容量瓶中，以蒸餾水定容至刻度，搖勻備用。2，多糖含量的測定：標準曲線的繪制：采用苯酚濃硫酸法。準確移取葡萄糖標液粗多糖含量計算：多糖得率（%）=【粗多糖質量（g）原料質量（g）】100%（50ugml）0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml，依次置于9個試管中，再分別加入去離子水補至0.8ml，搖勻后分別加入5%苯酚溶液0.3ml和濃硫酸2.0m