石榴皮多酚抗腫瘤活性機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：1.研究石榴皮多酚對(duì)人前列腺癌細(xì)胞PC-3的體內(nèi)外生長(zhǎng)抑制作用及可能機(jī)制。2.探討石榴皮多酚和TAM單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和MCF-7/Adr增殖和凋亡的影響。
　　方法：采用MTT法測(cè)定不同濃度組石榴皮多酚作用不同時(shí)間對(duì)PC-3細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)石榴皮多酚作用72h后PC-3細(xì)胞的周期時(shí)相變化及凋亡情況。上下法測(cè)定石榴皮多酚對(duì) BALB/cA-nu裸鼠的半數(shù)致死量；建立人前列腺癌PC-3裸

2、鼠移植瘤模型，觀察不同濃度石榴皮多酚對(duì)裸鼠皮下移植瘤的生長(zhǎng)抑制作用，HE染色觀察其對(duì)內(nèi)臟及腫瘤組織的作用，運(yùn)用TUNEL法觀察裸鼠皮下移植瘤組織中細(xì)胞凋亡情況，運(yùn)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)試劑盒檢測(cè)荷瘤小鼠血清中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和腫瘤壞死因子(TNF-α)的含量。不同濃度的石榴皮多酚與TAM單獨(dú)或聯(lián)合作用于MCF-7和MCF-7/Adr細(xì)胞，MTT法分析細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)單獨(dú)或聯(lián)合作用72h后MCF-7和M

3、CF-7/Adr細(xì)胞的凋亡情況。
　　結(jié)果：石榴皮多酚在體外能明顯抑制PC-3細(xì)胞的生長(zhǎng)，抑制效應(yīng)呈時(shí)間與濃度依賴型，流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示：石榴皮多酚可將PC-3細(xì)胞阻滯于G1期，并誘導(dǎo) PC-3細(xì)胞凋亡。與生理鹽水組比較石榴皮多酚能夠有效抑制前列腺癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)且可使腫瘤重量減輕，高劑量組(P＜0.05)，石榴皮多酚高、中、低劑量組抑瘤率分別為41.66％、36.57%、31.89%，高劑量組腫瘤組織壞死明顯，但對(duì)荷瘤小鼠

4、心、肝和腎臟有一定毒性；TUNEL檢測(cè)結(jié)果顯示石榴皮多酚可使腫瘤組織細(xì)胞凋亡率明顯升高(P＜0.05)；ELISA結(jié)果顯示：石榴皮多酚可使荷瘤小鼠血清中腫瘤壞死因子(TNF-α)的含量明顯升高(P＜0.05)，并可使中、高劑量組血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的含量降低。石榴皮多酚單獨(dú)或與TAM聯(lián)合應(yīng)用均可有效抑制MCF-7/Adr和MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)，并可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，且聯(lián)合方案顯示出明顯生長(zhǎng)抑制與促進(jìn)細(xì)胞凋亡優(yōu)勢(shì)。
　　結(jié)論：石榴皮多酚在體