ⅰ型整合子與e.coli多重耐藥性的相關(guān)性研究

1、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文Ⅰ型整合子與E.coli多重耐藥性的相關(guān)性研究姓名：蔣月申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：張秀英20060620S t u d i e s o n t h e R e l a t i o n s h i pb e t w e e n C l a s s II n t e g r o na n d M u l t i d r u g R e s i s t a n c eo f E ．c o l iA b

2、 s t r a c tE s c h e r i c h i ac o i l ( E ．C o l i ) i so n eo f t h em o s t c o m m o n p a t h o g e n si nt h em e d i c i n ea n dv e t e r i n a r ys u r g e o n c l i n i c a l l y , w h i c h e n d a n g e r t

3、 h e p o u l t r yi n d u s t r ya n dh u m a n s ．A n t i m i c r o b i a la g e n t sp l a yav e r yi m p o r t a n tr o l ei nc o n t r o l l i n gd i s e a s e sc a u s e d b yE s c h e r i c h i ac e l l ．A l o n gw

4、 i t ht h ew i d e l yu s eo fa n t i b i o t i c s ，a n t i b i o t i cr e s i s t a n c et o b a c t e r i ai s g e R i n gw o r s e ．T h ep r o b l e m o f b a c t e r i a lr e s i s t a n c ei sg e R i n g w o r s e

5、．T h e r e i s a s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s i n g t e n d e n c y o fm u l t i - r e s i s t a n c e t o b a c t e r i a ．T h er e s i s t a n c e o f E s c h e r i c h i a c o l i h a s r a i s e d s e v e

6、r a l c o n c e r n s r e l a t e d t o h a m a n h e a l t h a n dt h ed e v e l o p m e n to fp o u l t r yi n d u s t r y ．T h em e c h a n i s mo f b a c t e r i a lr e s i s t a n c e i n t e g r o ns y s t e mb a s

7、 eo nt h e d i s t r i b u t i o na n d c h a r a c t e r i z a t i o n o f c l a s s I i n t e g r o na m o n g E s c h e r i c h i a c o l i i s o l a t e d f r o ma n i m a l s ．T h e i n t e g r o no fb a c t e r i a

8、 li s D N A s y s t e mw h i c hc a r r y g e n ec a s s e t t ee n c o d i n ga n t i b i o t i cr e s i s t a n c e ，a n da l s oi st h ei m p o r t a n c em o l e c u l a rf o u n d a t i o no fb a c t e r i at o c a

9、p t u r ea n dd i s s e m i n a t et h e r e s i s t a n c e g e n e c l a s s I i n t e g r o n o n e o f t h e m o s t i m p o r t a n t m e c h a i s m o f b a c t e r i a lr e s i s t a n c e ．E x a m i n e d f o rb

10、a c t e r i a ls e n s i t i v i t yt oc o m m o na n t i m i c r o b i a l sa n d d e t e c tt h e i n t e g r a s eg e n eb y P C R ，s u i t a b l ef o r m e c h a i s m o f b a c t e r i aa n d c l i n i c a ls t u d

11、i e s ．I nt h i sp a p e r , t h e s e n s i t i v i t i e so f 2 0r e s i s t a n tE ．c e l l i s o l a t e df r o m p i g st o 1 6a n t i b i o t i c sw e r ea s s e s s e dw i t h ac o n t r o l l e dd i s kd i f f u

12、s i o nt e s t ；t h ed i s t r i b u t i o na n dt e n e n c yo f r e s i s t a n c ew e r e s t u d i e da n dt h er e s i s t a n c ec h a r a c t e r i s t i cw e r e a n a l y z e d ．T h ep r e s e n c ea n d g e n e

13、 t i cc o n t e n to f c l a s s I i n t e g r o nw e r ee x a m i n e d w i t hs p e c i f i cp r i m e r so f c l a s sl i n t e g r o n b yP e R a n d s e q u e n c i n g ．．T h er e s u l t so f t h es e n s i t i v i

14、 t yt e s to f 2 0r e s i s t a n t - E ．c e l l i s o l a t e st o 1 6k i n d sa n t i b i o t i c ss h o w e dt h a t a l l i s o l a t e p r e s e n t e da m u l t i p l e a n t i b i t i c r e s i s t a n c e ，t h e

15、r e s i s t a n t r a t i oo f E ．c o i l i s o l a t e s t op h y t o m y c i n ，c i d o m y c i n ，a c t i n o s p e c t a c i n ，a m p h e m y c i n ，f u r a x o n e ，c o t r i m o x a z o l ea n dS M Z - T M Pw e r e

16、1 0 0 ％，t h er e s i s t a n tr a t e o f E ．c o i l t of r a d i o m y c i na n dc i p r o f l o x a c i n w e r e e x c e e d e d9 0 ％，t h er e s i s t a n c er a d i ot oa m p l i g r a ma n da m i k a c i nW a s r e

17、l a t i v el o w e r , t h er e s i s t e n ts t y l eo f E s c h e r i c h i a c o l it o a n t i b i o t i c sW a s c o n c e n t r a t ei n 1 1 ·1 5k i n d s ．T w op r i m e r sw e r ed e s i g n e d t oa m p l i

18、 f yt h eg e n eo fc l a s sI i n t e g r o n ，t h et r a n s f o r m a n t s w e r ei d e n t i f i e d b yP C R t e s t ，a n d t h e n s e q u e n c e d ．1 3 w e r ep o s i t i v eo ff o rE s c h e r i c h i ac e l l c

19、 l a s sI i n t e g r o n d i h y d r o f o l a t er e d u c t a s e ( d h f r X l l ) a n dp u t a t i v ep r o t e i n g e n e s ，c o m p l e t e c d s ，a n d s t r e p t o m y c i n ／s p e c t i n o m y c i n 3 ’a d e

20、 n y l t r a n s f e r a s e ( a a d A 2 )p s e u d o g e n e ．T h e r a t e so f c l a s sI i n t e g r o ni nE ．c o i li s o l a t e df r o m p i gW a s a b o u t6 0 ％．T h e r e s u l t s h o w s t h a t t h e r e s i

21、s t a n c e r a t e s o f E s c h e r i c h i a c o l i i s i n c r e a s i n g ，t h e r e i s as i g n i f i c a n t l yi n c r e a s i n gt e n d e n c yo f m u l t i —r e s i s t a n c e ，t h ep r o b l e m o fb a c t

22、 e r i a lr e s i s t a n c e i sg e R i n gw o r s e ．T h ep r e s e n c ea n dg e n e t i cc o n t e n t o f c l a s sI i n t e g r o nw e r e e x a m i n e d w i t hs p e c i f i cp r i m e r so fc l a s s I i n t e g