環(huán)境激素鄰苯二甲酸二環(huán)己酯和鄰苯二甲酸二丁酯熒光免疫分析新方法研究.pdf

1、環(huán)境激素類(lèi)鄰苯二甲酸酯是一類(lèi)重要的環(huán)境激素物質(zhì)。它干擾生物為保持體內(nèi)平衡并調(diào)節(jié)生長(zhǎng)過(guò)程的正常激素的產(chǎn)生、釋放、轉(zhuǎn)移、代謝、反應(yīng)和消除，或在未受損的生物后代中引起不良的健康影響和內(nèi)分泌功能的改變。近年來(lái)，隨著工業(yè)生產(chǎn)和塑料制品的使用，塑料垃圾的大量增加，鄰苯二甲酸酯不斷進(jìn)入環(huán)境，已成為全球性最普遍的污染物之一，廣泛存在于大氣、水體、土壤、生物體等自然環(huán)境中。 目前文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)鄰苯二甲酸酯監(jiān)測(cè)的方法主要是GC、HPLC和GC/MS。但

2、是這些分析方法將待測(cè)污染物從樣品中分離提取并去除雜質(zhì)干擾的前處理過(guò)程十分復(fù)雜，操作費(fèi)時(shí)，分析成本昂貴。因此，有必要開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單、快捷且經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)技術(shù)。免疫分析技術(shù)以其快速、靈敏度高、經(jīng)濟(jì)、樣品所需量少等優(yōu)點(diǎn)而成為21世紀(jì)最具競(jìng)爭(zhēng)性和挑戰(zhàn)性的監(jiān)測(cè)分析技術(shù)。目前，免疫分析技術(shù)應(yīng)用于小分子物質(zhì)的監(jiān)測(cè)日益受到重視，已經(jīng)成為監(jiān)測(cè)分析環(huán)境中痕量污染物研究的熱點(diǎn)。 經(jīng)文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，用免疫分析方法測(cè)定環(huán)境激素物質(zhì)的報(bào)道很少。這表明免疫分析技術(shù)用

3、于分析環(huán)境激素物質(zhì)有很大的發(fā)展前景，有待進(jìn)一步研究。為此，本文研究的目標(biāo)是建立測(cè)定環(huán)境激素類(lèi)鄰苯二甲酸酯的免疫分析新方法。圍繞這一目標(biāo)，主要進(jìn)行了以下幾個(gè)力面的研究工作： 一．用本課題組提供的鄰苯二甲酸二環(huán)己酯全抗原和鄰苯二甲酸二丁酯全抗原免疫兔子，從兔子血清中獲得了鄰苯二甲酸二環(huán)己酯和鄰苯二甲酸二丁酯抗體。并對(duì)制備的這兩種抗體進(jìn)行了純化。二．用制備的鄰苯二甲酸二環(huán)己酯抗體包被酶標(biāo)板，以酶聯(lián)免疫雙抗夾心法為基礎(chǔ)，以異硫氰酸熒光素

4、為熒光探針，研究了雙抗夾心免疫反應(yīng)的條件，建立了鄰苯二甲酸二環(huán)己酯抗體包被熒光免疫分析新方法和競(jìng)爭(zhēng)熒光免疫分析新方法。該方法靈敏度高，選擇性好,線(xiàn)性范圍寬，用該方法測(cè)定自來(lái)水和飲用水中的鄰苯二甲酸二環(huán)己酯，結(jié)果令人滿(mǎn)意。 三．用制備的鄰苯二甲酸二丁酯抗原和抗體分別包被酶標(biāo)板，以酶聯(lián)免疫雙抗夾心法為基礎(chǔ)，以異硫氰酸熒光素為熒光探針，研究了雙抗夾心免疫反應(yīng)的條件，建立了鄰苯二甲酸二丁酯抗原包被和抗體包被熒光免疫分析新方法。該方法靈敏