EoNPV感染兩近緣種茶尺蠖的差異研究.pdf

1、小茶尺蠖Ectropis obliqua和灰茶尺蛾Ectropis grisescens為茶尺蠖兩近緣種，是茶園中最主要的食葉類害蟲。由于二者在外觀形態(tài)、生物學習性方面極其相似，一直以來作為茶尺蠖一個種進行田間防治。近年來，在茶園使用茶尺蠖核型多角體病毒(E.obliqua nucleopolyhedrovirus，EoNPV)進行防治時出現(xiàn)不同地區(qū)防治效果差異性較大的現(xiàn)象，進而研究明確茶尺蠖存在兩近緣種。本文使用三種不同濃度EoNPV

2、處理小茶尺蠖和灰茶尺蛾，比較分析EoNPV對兩近緣種茶尺蠖致死率的差異，進一步驗證田間防治中EoNPV對小茶尺蠖和灰茶尺蛾的防治效果差異。同時，采用濃度為1×107 PIB/mL的EoNPV喂飼小茶尺蠖和灰茶尺蛾，檢測病毒粒子在兩近緣種茶尺蠖體內增殖動態(tài)的差異，以期探索EoNPV對兩近緣種茶尺蠖致死率差異原因。結合灰茶尺蛾感染EoNPV后的轉錄組數(shù)據(jù)分析，篩選免疫相關的抗菌肽基因，采用qPCR檢測兩近緣種茶尺蠖體內抗菌肽基因表達差異，進

3、一步從抗菌肽基因表達的角度解釋EoNPV對兩近緣種茶尺蠖產(chǎn)生致死率差異的機理。通過以上實驗本研究得到以下三個結論:
　　1.三種不同濃度EoNPV病毒液處理小茶尺蠖和灰茶尺蛾，毒效實驗結果表明不同濃度EoNPV對小茶尺蠖的累計致死率存在顯著差異(P＜0.05)，而對灰茶尺蛾的累計致死率并沒有顯著差異(P＜0.05);同時，比較同一濃度EoNPV對兩近緣種茶尺蠖致死率的差異發(fā)現(xiàn)，EoNPV對小茶尺蠖的累計死亡率極顯著高于灰茶尺蛾，表

4、明小茶尺蠖對EoNPV敏感性高，而灰茶尺蛾對EoNPV敏感性低。
　　2.通過檢測病毒粒子在兩近緣種茶尺蠖體內增殖動態(tài)發(fā)現(xiàn)，在EoNPV處理后18h，小茶尺蠖體內的病毒拷貝數(shù)開始快速增殖;而灰茶尺蛾體內則是在36h后開始快速增殖。小茶尺蠖體內EoNPV快速增殖時間早于灰茶尺蛾，且在EoNPV處理后的不同時間點小茶尺蠖體內病毒的絕對拷貝數(shù)均顯著高于灰茶尺蛾，這說明小茶尺蠖體內更適宜EoNPV的增殖，這可能也是EoNPV病毒對小茶尺蠖

5、的致死率顯著高于灰茶尺蛾的原因。
　　3.進一步采用qPCR檢測發(fā)現(xiàn)，病毒處理后gloverin、attacin和moricin3個基因在兩近緣種茶尺蠖體內均表達上調，gloverin基因在12 h達到最大值，moricin基因在48 h達到最大值，且gloverin和moricin基因在灰茶尺蛾中表達量顯著高于小茶尺蠖，而attacin基因在兩近緣種茶尺蠖體內則沒有上述表達規(guī)律，推測gloverin和moricin兩個基因在兩近