川東獐牙菜及其兩種近緣種的指紋圖譜分析.pdf

1、民族藥是中國特色醫(yī)藥體系的一部分，其發(fā)展最大的阻礙是基礎(chǔ)理論薄弱及質(zhì)量控制體系不完善，中藥指紋圖譜的出現(xiàn)為民族藥物質(zhì)量控制供了新方法。中藥指紋圖譜技術(shù)廣泛應(yīng)用于中藥鑒定與質(zhì)量評價，方法涉及高效液相色譜、紅外光譜、紫外光譜等?；谔烊凰幬锏耐葱裕兴幹讣y圖譜技術(shù)可以作為建立民族藥物質(zhì)量控制體系的有效手段。本文利用現(xiàn)代分析技術(shù)結(jié)合化學(xué)指紋圖譜鑒別不同產(chǎn)地川東獐牙菜和區(qū)分及評價3種獐牙菜屬藥用植物。
　　論文的第一章論述了民族藥和中藥

2、的聯(lián)系，指紋圖譜法在鑒別和評價民族藥物中起到的作用，川東獐牙菜的介紹及其價值和目前該民族藥主要的研究領(lǐng)域，在現(xiàn)階段川東獐牙菜的研究中，利用指紋圖譜鑒別及評價的報導(dǎo)較少。
　　第二章采用傅里葉紅外光譜指紋圖譜鑒別不同產(chǎn)地川東獐牙菜，采集4個地區(qū)70株樣品不同部位的紅外光譜數(shù)據(jù)，原始光譜經(jīng)預(yù)處理（自動基線校正，自動平滑，一階求導(dǎo)，二階求導(dǎo)）后導(dǎo)入OMNIC8.2，比較吸收峰的差異；用SIMCA-P+10.0進(jìn)行PLS-DA分析，以前三

3、個主成分三維得分圖比較產(chǎn)地鑒別效果；紅外光譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入SPSS19.0，進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，通過樹狀圖比較不同部位分類效果。FTIR技術(shù)結(jié)合PLS-DA與HCA方法能夠快速準(zhǔn)確地鑒別不同產(chǎn)地川東獐牙菜，不同部位產(chǎn)地鑒別效果具有差異，二階求導(dǎo)處理增強(qiáng)了光譜的特異性，使PLS-DA的三維主成分得分圖分類效果更明顯。
　　第三章利用紅外指紋圖譜鑒別3種獐牙菜屬藥用植物（川東獐牙菜、狹葉獐牙菜和紫紅獐牙菜），比較原始光譜圖，進(jìn)行判別分析和聚類

4、分析。不同部位的分類效果是不一樣的，莖和葉的分類效果比根的好。
　　第四章采用超高效液相色譜指紋圖譜結(jié)合相似度分析、主成分分析和聚類分析鑒別不同產(chǎn)地川東獐牙菜。文章比較了不同產(chǎn)地樣品莖和葉中5種標(biāo)準(zhǔn)化合物的含量，不同部位中5種化合物的含量差異明顯。聚類分析結(jié)果顯示，單純莖或者葉數(shù)據(jù)矩陣鑒別效果不佳，將兩者矩陣結(jié)合得到聚類效果極佳的分類圖。主成分3D得分圖，葉數(shù)據(jù)矩陣的鑒別效果優(yōu)于莖數(shù)據(jù)。
　　第五章采集3種獐牙菜共27株樣品

5、色譜圖，將色譜圖導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)軟件，得到樣品保留時間和峰面積數(shù)據(jù)，對3組樣品進(jìn)行相似度分析。峰面積數(shù)據(jù)導(dǎo)入SPSS和SIMCA-P+軟件進(jìn)行聚類分析和主成分分析，得到樹狀圖和主成分得分圖，觀察聚類效果。不同種獐牙菜藥用植物中指示化合物的含量差異大，相同種類獐牙菜不同個體中指示化合物含量差異大。聚類分析樹狀圖分類準(zhǔn)確率為85.2％，誤判的紫紅獐牙菜樣品與其余的紫紅獐牙菜樣品相比，指示化合物含量極低。主成分分析得分圖將3

6、種獐牙菜區(qū)分開，相比川東獐牙菜和狹葉獐牙菜，紫紅獐牙菜聚類效果較分散，個體之間差異大。
　　第六章采集4個地區(qū)川東獐牙菜不同部位的紫外光譜，川東獐牙菜不同部位紫外光譜圖均在240 nm、276 nm和324 nm處有特征吸收峰，前人研究中240 nm和276 nm為獐牙菜苦苷和龍膽苦苷最大吸收峰值，根據(jù)根、莖和葉的不同稀釋倍數(shù)與比爾朗伯定律推測這兩種化學(xué)成分在葉中含量最高。光譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入UVProbe2.34比較不同產(chǎn)地相同部位的紫

7、外光譜圖，將原始光譜數(shù)據(jù)以及經(jīng)過8點平滑、一階求導(dǎo)和二階求導(dǎo)后的數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA-P11.5，進(jìn)行主成分分析（PCA），比較三維得分圖的產(chǎn)地鑒別效果。主成分分析中以葉的原始數(shù)據(jù)以及8點平滑處理數(shù)據(jù)鑒別效果最佳，主成分累計貢獻(xiàn)率均為98.8%，其余預(yù)處理方式無法取得較好的鑒別效果可能與主成分?jǐn)?shù)累計值有關(guān)（一階求導(dǎo)為83.9%，二階求導(dǎo)為47.3%）。根部數(shù)據(jù)能將重慶、湖北的樣品和湖南樣品分開，但重慶和湖北的樣品無法區(qū)分。建立偏最小二乘判

8、別分析（PLS-DA）模型，檢測鑒別模型的可靠性，并為預(yù)測更多產(chǎn)地的區(qū)分提供依據(jù)。將驗證集帶入訓(xùn)練集建立的模型進(jìn)行偏最小二乘判別分析，能區(qū)分產(chǎn)地，證明該模型產(chǎn)地鑒別效果可行。PLS-DA中訓(xùn)練集的預(yù)測值和真實值相關(guān)系數(shù)為0.985，其評估均方差（RMSEE）為0.159，驗證集導(dǎo)入訓(xùn)練集后其預(yù)測值與真實值的相關(guān)系數(shù)為0.927，預(yù)測均方差（RMSEP）為0.327，RMSEE與RMSEP兩者相近，且都小于0.500，該模型的預(yù)測可靠性高