釩配合物抑制PTP1B影響細(xì)胞磷酸化的初步研究.pdf

1、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮重要作用,廣泛影響細(xì)胞各種代謝過(guò)程如細(xì)胞增殖、分化、遷移、凋亡、免疫應(yīng)答等過(guò)程。PTPs的異常表達(dá)與許多疾病諸如糖尿病、癌癥、肥胖癥、類風(fēng)濕、免疫功能紊亂等密切有關(guān)。PTP1B是一種胞內(nèi)蛋白質(zhì),是最早被發(fā)現(xiàn)和純化的蛋白酪氨酸磷酸酶。研究表明,PTP1B在胰島素受體以及瘦素受體信號(hào)通路中起著負(fù)調(diào)控作用。敲除PTP1B基因的小鼠對(duì)胰島素的敏感性以及高脂肪飲食下對(duì)肥胖癥的耐受性都得到了

2、很大的提高。因此,PTP1B成為糖尿病新藥設(shè)計(jì)的理想靶標(biāo),近年來(lái),其抑制劑的研究受到人們廣泛的關(guān)注。釩化合物具有胰島素樣活性并能強(qiáng)烈抑制PTPs,PTP1B選擇性釩配合物可望發(fā)展成為低毒高效的抗糖尿病藥物。我們前期研究顯示氧釩配合物[VIVO(nbbb)(H2O)2](1)和[VIVO(bpmp)2](2)對(duì)PTP1B表現(xiàn)較好的選擇性,本文在此基礎(chǔ)上對(duì)其影響細(xì)胞磷酸化進(jìn)行了初步研究,主要工作如下。
　　本文主要工作是運(yùn)用蛋白免疫印

3、跡法檢測(cè)氧釩配合物(1)和(2)對(duì)三種腫瘤細(xì)胞(MCF-7、HepG-2和Hela)內(nèi)PTPs底物的磷酸化水平的影響進(jìn)行探索。結(jié)果表明:氧釩配合物(1)能明顯增強(qiáng) PTP1B作用底物 P-Src(Y529)、(IR/IGF1R)(PYPYPY115811621163)以及 P-EGFR(Y1092)磷酸化,而對(duì) TCPTP作用底物P-Src(Y418)磷酸化的影響很小,特別是在MCF-7細(xì)胞中,且該配合物提高PTP1B作用底物磷酸化的能

4、力要明顯強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照VOSO4,表明這兩種釩配合物特別是(1)進(jìn)入細(xì)胞仍然保持對(duì) PTP1B的選擇性,而且不同的釩配合物對(duì)不同細(xì)胞的磷酸化影響不同,同一種配合物對(duì)不同細(xì)胞的作用也不同,為我們今后進(jìn)一步篩選釩配合物抗糖尿病藥物提供了有益的信息。
　　此外,我們還研究了生物小分子釩配合物對(duì)蛋白酪氨酸磷酸酶的抑制作用和選擇性,結(jié)果顯示,大部分生物小分子氧釩配合物對(duì)PTP1B表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑制作用,化合物[VO(Phe)2]表現(xiàn)出最強(qiáng)的抑制