基因指紋用于23株嗜酸氧化亞鐵硫桿菌菌株親緣性研究.pdf

1、中圖分類號(hào)Q坌三窆UDC579碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q三三密級(jí)公玨基因指紋用于23株嗜酸氧化亞鐵硫桿菌菌株親緣性研究GeneticFingerprinttoStudyRelatednessofAcidithiobacillusferrooxidansStrains作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：范宏偉生物工程微生物冶金資源加工與生物工程學(xué)院吳學(xué)玲副教授論文答辯日期型蘭：莖三三答辯委員會(huì)中南大學(xué)二。一三年五月基因指

2、紋技術(shù)用于23株嗜酸氧化亞鐵硫桿菌菌株親緣性研究摘要：嗜酸氧化亞鐵硫桿菌作為一種重要的微生物冶金細(xì)菌，在世界生物冶金領(lǐng)域內(nèi)都有著廣泛的應(yīng)用。雖然嗜酸氧化亞鐵硫桿菌已經(jīng)得到深入的研究，但是由于其特性，難以分離純化，且種內(nèi)菌株難以用傳統(tǒng)方法快速鑒別。本文研究了嗜酸氧化亞鐵硫桿菌菌株對(duì)銅離子的最大耐受能力，并將其按表型進(jìn)行分類。結(jié)果顯示，菌株的銅離子耐受能力從60mmol／L至200mmol／L，菌株問(wèn)的差異較大。嗜酸氧化亞鐵硫桿菌菌株耐受能

3、力從高到低依次為DY26、DY30、DY32、GF、BY01、BY0502、GDA、GDB、GD9、DXS、DYl5、DYl8、JYC2、JYC3、DX5、YTW、JYC1、BY03、DC、GD0。銅離子耐受能力較高的菌株從高到低為DY26、DY30、DY32、GF、By01、BY0502、GDA、GDB、GD9、DXS、DYl5、DYl8、JYC2、JYC3，最大銅離子耐受濃度為200160mmol／L；耐受能力較低的菌株從高到低為D

4、X5、YTW、JYC1、BY03、DC、GD0，最大銅離子耐受濃度為120—60mmol／L。為研究23株嗜酸氧化亞鐵硫桿菌菌株的基因多樣性，以及基因指紋技術(shù)分類與其表型特性的相關(guān)性，使用40種RAPD(randomamplificationofpolymorphicDNA)引物，通過(guò)PCR擴(kuò)增23株菌株的基因組DNA，產(chǎn)物凝膠電泳并使用紫外成像系統(tǒng)成像，并分析所得條帶的有無(wú)，從而使用Jaccard系數(shù)和UPGMA分析菌株間親緣相關(guān)性。

5、實(shí)驗(yàn)共得到了518個(gè)不同長(zhǎng)度的可重復(fù)條帶，所有40種隨機(jī)引物進(jìn)行的RAPD實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，23株菌種間相似系數(shù)最小為428％，而相似系數(shù)最大為921％。OPC組引物能產(chǎn)生更多的特異基因指紋，并在嗜酸氧化亞鐵硫桿菌種內(nèi)擁有更強(qiáng)的分類鑒定能力。銅離子耐受能力較高的14株菌株中，相似系數(shù)最高為914％(DY26與DY30)，相似系數(shù)最低為612％(BY01與BY0502)，銅離子耐受能力較低的6株菌株中，相似系數(shù)最高為888％(DX5與DC)，而