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文檔簡介
1、單寧為重要的植物次生化合物,影響動物的取食行為。動物下丘腦是調節(jié)取食的主要中樞,其中食欲素(Orexin)和黑色素濃集激素(melanin concentrating hormone,MCH)是下丘腦中的兩種重要神經肽,它們是影響嚙齒動物取食的關鍵食欲因子。布氏田鼠為內蒙古草原主要植食性動物。本研究以室內繁殖的布氏田鼠為研究對象,在布氏田鼠舌表面滴灌不同劑量(0、3%及6%,分別為對照、低劑量及高劑量組)的單寧酸溶液2h后或連續(xù)滴灌5d
2、、10d和20d后,用熒光實時定量PCR方法測定其下丘腦MCH前體蛋白(precursorsprotein of MCH,pp-MCH)和Orexin前體蛋白(precursors protein of Orexin,pp-Orexin)及相關受體mRNA轉錄水平;用Western blot方法檢測定它們的蛋白表達量;并定期測定其日取食量、體重及囤積脂肪。探討植物次生化合物影響嚙齒動物下丘腦食欲肽表達的神經機制,闡明植物次生化合物在調控
3、動物取食行為中的重要作用,為草原動植物間的協(xié)同進化提供理論依據(jù)。研究結果如下:
1、在5d、10d和20d的單寧酸處理后,各處理組布氏田鼠體重與對照組之間沒有顯著差異。
2、在處理10d后,單寧酸降低布氏田鼠的取食量;而處理20d后,單寧酸又會增加布氏田鼠的取食量。
3、在單寧酸處理5d和10d后,布氏田鼠的脂肪囤積指數(shù)與對照組之間沒有差異,而到第20d時,單寧酸降低布氏田鼠的脂肪囤積。
4、基因
4、與蛋白表達的結果顯示,單寧酸處理2h后,處理組雌雄布氏田鼠pp-MCHmRNA轉錄水平和蛋白含量與對照組間沒有顯著差異。受體基因MCHR1(typeⅠ receptor ofMCH)的mRNA轉錄水平在雄性布氏田鼠的處理組和對照組間也沒有差異,而在雌性布氏田鼠中,單寧酸卻抑制了MCHR1基因的mRNA轉錄水平。在5d、10d和20d各處理組中,單寧酸均抑制了雌雄布氏田鼠pp-MCH基因、受體基因MCHR1 mRNA轉錄水平和pp-MCH
5、蛋白的表達。
單寧酸處理處理2小時后,單寧酸促進雌雄性布氏田鼠pp-Orexin基因和受體OX1R(typeⅠ receptor of Orexin)基因的mRNA的轉錄,對pp-Orexin蛋白表達卻無影響;處理5d后,單寧酸抑制雌雄田鼠pp-Orexin基因、受體OX1R基因mRNA轉錄和pp-Orexin蛋白的表達;但在連續(xù)處理10d和20d后,單寧酸使雄性田鼠的pp-Orexin基因、OX1R基因mRNA轉錄水平和pp
6、-Orexin蛋白的表達增加;但單寧酸仍然抑制雌性布氏田鼠pp-Orexin基因mRNA轉錄和蛋白表達以及OX1R基因mRNA的轉錄。受體OX2R(typeⅡ receptor ofOrexin)基因mRNA轉錄水平在雌雄布氏田鼠中表達趨勢相同,在處理2h后,單寧酸促進了OX2R基因mRNA轉錄,而在處理5d、10d和20d后,單寧酸抑制了OX2R基因的轉錄。
以上結果表明,單寧酸在較短的時間內能抑制布氏田鼠的取食,而隨著處理
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