單寧酸對(duì)瘤胃發(fā)酵特性及甲烷產(chǎn)量的影響.pdf

1、本文以單寧酸為試驗(yàn)材料，研究了單寧酸對(duì)瘤胃體外發(fā)酵和甲烷產(chǎn)量的影響。通過對(duì)瘤胃體外發(fā)酵系統(tǒng)中單寧酸的生物降解以及對(duì)瘤胃內(nèi)環(huán)境影響的研究，初步確立了單寧酸改善瘤胃發(fā)酵的適宜添加量及其效果；并探討了在不同精粗比底物條件下單寧酸對(duì)瘤胃體外發(fā)酵和甲烷產(chǎn)量的作用。主要研究結(jié)果如下： 1.建立了毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定瘤胃體外發(fā)酵產(chǎn)物中甲烷和揮發(fā)性脂肪酸的方法和條件。以高純氮?dú)庾鳛檩d氣，用氫火焰離子化檢測(cè)器，用ATSE-30毛細(xì)管柱(30m×0.

2、32mm×0.53um)和ZB-FFAP(7GH-G009-11)毛細(xì)管柱(30m×0.25mm×0.25um)，通過對(duì)載氣壓力及流速、柱溫、汽化室和檢測(cè)室溫度等一系列條件的摸索，可在4.5min之內(nèi)快速準(zhǔn)確的測(cè)定瘤胃發(fā)酵液中乙、丙和丁酸的含量；甲烷的保留時(shí)間為0.43min。 2.采用薄層層析法對(duì)單寧酸的生物降解產(chǎn)物進(jìn)行了研究。在此培養(yǎng)系統(tǒng)中，瘤胃培養(yǎng)液為30ml(含單寧酸0.1﹪)，試驗(yàn)分兩個(gè)處理，在100m139℃預(yù)熱的培

3、養(yǎng)管內(nèi)，一組添加淀粉2mg/ml瘤胃液作為能量來源，另一組不添加，每個(gè)處理三個(gè)重復(fù)，同時(shí)設(shè)一個(gè)空白對(duì)照組，另一個(gè)平行對(duì)照組加入高壓處理過的瘤胃液。體外培養(yǎng)72h后，對(duì)于添加單寧酸的處理組體外產(chǎn)氣量和氨的濃度降低。除對(duì)照組和對(duì)照組+單寧酸在24h外，隨著氨氮濃度的降低，產(chǎn)氣量卻逐漸增加，在24h發(fā)酵后更加明顯。對(duì)添加單寧酸的瘤胃液厭氧培養(yǎng)的結(jié)果用運(yùn)層析色譜法分析表明，五倍子酸和焦棓酸在24h發(fā)酵后的瘤胃培養(yǎng)液中被檢測(cè)到。五倍子酸和單寧酸在

4、體外培養(yǎng)48h和72h的瘤胃液中沒有檢測(cè)到，焦棓酸和間苯二酚是可以檢測(cè)到的唯一代謝產(chǎn)物。在添加單寧酸的高壓蒸氣處理過的瘤胃液中沒有發(fā)現(xiàn)其任何代謝產(chǎn)物。 3.采用Menke的Syringe體外培養(yǎng)系統(tǒng)研究單寧酸對(duì)瘤胃發(fā)酵和甲烷產(chǎn)量的影響。試驗(yàn)設(shè)四個(gè)處理，單寧酸的添加量分別為4、6、8和10mg，每個(gè)處理三個(gè)重復(fù)，同時(shí)設(shè)一個(gè)空白對(duì)照組。體外培養(yǎng)24h后，各處理組比對(duì)照組分別增加了3.4﹪，5.0﹪，10.1﹪和13.2﹪；試驗(yàn)組的甲

5、烷產(chǎn)量均比對(duì)照組有所降低；處理組氨氮濃度顯著低于對(duì)照組(p＜0.01)，分別比對(duì)照組降低了8.7﹪、19.6﹪、16.7﹪和25.1﹪，而微生物蛋白的產(chǎn)量卻顯著升高(p＜0.01)。在以黑麥草為底物的Syringe的系統(tǒng)中，單寧酸的適宜添加量為6～10mg，即0.2～0.4mg/ml瘤胃液。 4.研究不同精粗比底物條件下單寧酸對(duì)瘤胃發(fā)酵和甲烷產(chǎn)量的影響。對(duì)以粗料為主的底物，添加單寧酸可以提高體外產(chǎn)氣量，而當(dāng)?shù)孜镏芯媳壤笥?0