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文檔簡介
1、擬南芥PDM1基因編碼一個PPR家族PLS亞家族蛋白,為葉綠體rpoA多順反子加工所必需。本研究發(fā)現(xiàn)PDM1在rpoA單順反子的剪切和葉綠體發(fā)育上具有重要作用。擬南芥pdm1突變體呈白化致死表型,葉綠體發(fā)育存在嚴(yán)重缺陷。將PDM1與GFP構(gòu)建的融合載體在擬南芥原生質(zhì)體中表達(dá),GFP熒光與葉綠素?zé)晒夤捕ㄎ?,這說明PDM1定位于葉綠體。在pdm1突變體中,大約990nt的rpoA單順反子轉(zhuǎn)錄本缺失。我們檢測了PEP和NEP共同轉(zhuǎn)錄的atpB
2、基因在pdm1中的轉(zhuǎn)錄模式,發(fā)現(xiàn)PEP轉(zhuǎn)錄的2.6kb條帶檢測不到,僅存在NEP轉(zhuǎn)錄的2.0kb條帶,這一結(jié)果進(jìn)一步驗證了PEP活性的缺失。然而,在pdm1突變體中RpoA蛋白的積累量能夠達(dá)到野生型的1/3,這表明L23-L2-S19-L22-S3-L16-L14-S8-L36-S11-rpoA轉(zhuǎn)錄剪切得到的其他轉(zhuǎn)錄本能夠作為蛋白翻譯的模板。為了了解PDM1是否結(jié)合在rpoA前體mRNA上,我們利用PDM1-FLAG嵌合基因成功互補pd
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