秀麗隱桿線蟲14-3-3蛋白FTT-2在咽部肌肉細(xì)胞中的功能分析.pdf

1、14-3-3蛋白是一個(gè)幾乎在所有真核生物中表達(dá)的高度保守的蛋白質(zhì)家族,它們廣泛參與了細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控、蛋白跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等重要生命活動的調(diào)節(jié)進(jìn)程。眾多的研究表明該蛋白家族的表達(dá)異常與多種疾病的發(fā)生都密切相關(guān)。目前對于14-3-3蛋白的結(jié)構(gòu)以及與其他蛋白間的相互作用研究比較多,而對于14-3-3的亞型特異性功能和組織特異性調(diào)控的研究工作卻很少。
　　 本研究以秀麗隱桿線蟲為模式生物來研究秀麗隱桿線蟲中僅有的兩個(gè)14-3-

2、3蛋白FTT-2和PAR-5在功能上的差異。通過對構(gòu)建的FTT-2和PAR-5表達(dá)模式互換的轉(zhuǎn)基因蟲株的表型分析本研究發(fā)現(xiàn):PAR-5在某些功能上能夠替代FTT-2,例如:對后代數(shù)目的調(diào)控;但是在另外一些功能上無法替代FIT-2,例如:對壽命的調(diào)控。
　　 本研究還發(fā)現(xiàn)FTT-2在秀麗隱桿線蟲咽部肌肉細(xì)胞中過量表達(dá)可以延長壽命,減少產(chǎn)卵數(shù),增強(qiáng)熱抗性,調(diào)控體長并改變咽部結(jié)構(gòu)發(fā)育。為進(jìn)一步探討FTT-2蛋白不同結(jié)構(gòu)域?qū)Σ煌硇偷目?/p>

3、能調(diào)控作用,本研究構(gòu)建了在咽部肌肉表達(dá)缺失部分結(jié)構(gòu)域的FTT-2的轉(zhuǎn)基因線蟲并對其進(jìn)行了表型分析。結(jié)果顯示:配體結(jié)合域可能對壽命、產(chǎn)卵量和咽部結(jié)構(gòu)發(fā)育的調(diào)控起作用:二聚化區(qū)域和配體結(jié)合域?qū)篃嵝栽鰪?qiáng)是必須的;核輸出信號區(qū)域影響FTT-2蛋白的亞細(xì)胞定位;二聚化區(qū)域、配體結(jié)合域和核輸出信號共同參與了FTT-2在咽部肌肉中對體長發(fā)育的調(diào)控。最后本研究探討了FTT-2在咽部肌肉表達(dá)導(dǎo)致的壽命延長與自噬作用之間的可能聯(lián)系,初期結(jié)果顯示自噬對FT