秀麗隱桿線蟲14-3-3蛋白FTT-2在咽部肌肉細(xì)胞中的功能分析.pdf

1、14-3-3蛋白是一個(gè)幾乎在所有真核生物中表達(dá)的高度保守的蛋白質(zhì)家族,它們廣泛參與了細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控、蛋白跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等重要生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)進(jìn)程。眾多的研究表明該蛋白家族的表達(dá)異常與多種疾病的發(fā)生都密切相關(guān)。目前對(duì)于14-3-3蛋白的結(jié)構(gòu)以及與其他蛋白間的相互作用研究比較多,而對(duì)于14-3-3的亞型特異性功能和組織特異性調(diào)控的研究工作卻很少。
　　 本研究以秀麗隱桿線蟲為模式生物來(lái)研究秀麗隱桿線蟲中僅有的兩個(gè)14-3-

2、3蛋白FTT-2和PAR-5在功能上的差異。通過(guò)對(duì)構(gòu)建的FTT-2和PAR-5表達(dá)模式互換的轉(zhuǎn)基因蟲株的表型分析本研究發(fā)現(xiàn):PAR-5在某些功能上能夠替代FTT-2,例如:對(duì)后代數(shù)目的調(diào)控;但是在另外一些功能上無(wú)法替代FIT-2,例如:對(duì)壽命的調(diào)控。
　　 本研究還發(fā)現(xiàn)FTT-2在秀麗隱桿線蟲咽部肌肉細(xì)胞中過(guò)量表達(dá)可以延長(zhǎng)壽命,減少產(chǎn)卵數(shù),增強(qiáng)熱抗性,調(diào)控體長(zhǎng)并改變咽部結(jié)構(gòu)發(fā)育。為進(jìn)一步探討FTT-2蛋白不同結(jié)構(gòu)域?qū)Σ煌硇偷目?/p>

3、能調(diào)控作用,本研究構(gòu)建了在咽部肌肉表達(dá)缺失部分結(jié)構(gòu)域的FTT-2的轉(zhuǎn)基因線蟲并對(duì)其進(jìn)行了表型分析。結(jié)果顯示:配體結(jié)合域可能對(duì)壽命、產(chǎn)卵量和咽部結(jié)構(gòu)發(fā)育的調(diào)控起作用:二聚化區(qū)域和配體結(jié)合域?qū)篃嵝栽鰪?qiáng)是必須的;核輸出信號(hào)區(qū)域影響FTT-2蛋白的亞細(xì)胞定位;二聚化區(qū)域、配體結(jié)合域和核輸出信號(hào)共同參與了FTT-2在咽部肌肉中對(duì)體長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控。最后本研究探討了FTT-2在咽部肌肉表達(dá)導(dǎo)致的壽命延長(zhǎng)與自噬作用之間的可能聯(lián)系,初期結(jié)果顯示自噬對(duì)FT