補腎降壓理論及補腎降壓方對自發(fā)性高血壓大鼠miR-1調(diào)控心室肥厚ERK通路的影響.pdf

1、高血壓是心腦血管事件的重要危險因素?，F(xiàn)代醫(yī)學在降壓治療上取得長足進步，但血壓達標率仍不滿意。中醫(yī)藥在平穩(wěn)降壓的同時還具有多環(huán)節(jié)保護機制，但對主要終點事件的證據(jù)有待加強。
　　 高血壓病屬“眩暈”范疇，從肝論治已成為現(xiàn)今臨床治療的“專家共識”。但通過對歷代文獻的系統(tǒng)梳理，發(fā)現(xiàn)與古代的“眩暈”相比，無論在內(nèi)涵、病機還是治療上，高血壓與之均存在較大差異。由于在理論認識上存在不足，臨床治療上存在錯位，導致中醫(yī)藥降壓療效不理想。這就是照搬

2、古代肝風理論治療高血壓病收效欠佳的根源所在。因此，對本病病機特征的認識，切莫先入為主囿于陰虛陽亢，而應忠實于臨床實際，突破既往從肝論治的理論局限，重新探索其證治規(guī)律。
　　 現(xiàn)代臨床對高血壓疾病的早期診斷、降壓西藥的早期干預以及不斷優(yōu)化與廣泛運用，使升高的血壓被迅速控制，直接改變了高血壓病的自然進程，使其中醫(yī)學病機演變規(guī)律已經(jīng)發(fā)生了很大變化。進一步研究發(fā)現(xiàn)，腎虛是現(xiàn)今臨床治療高血壓病面臨的新問題。形成腎虛證的原因主要與年老導致的

3、生理性腎虛，大病久病及腎導致的病理性腎虛，降壓西藥的不良反應，以及降壓西藥的治療作用密切相關(guān)。因此，腎虛是現(xiàn)今高血壓病病機關(guān)鍵，而補腎降壓則為其重要治療策略。
　　 “補腎降壓方”是基于補腎降壓的治則治法而形成的治療高血壓病的經(jīng)驗方。前期文獻及臨床研究顯示，本方在改善高血壓病患者腎虛證的同時，還能平穩(wěn)降壓。圍繞“穩(wěn)定血壓”及“保護靶器官”這兩大目標，本實驗旨在探討中藥對血壓、心率、左心室肥厚的影響及其調(diào)控機制，為補腎降壓這一新策

4、略提供實驗依據(jù)。
　　 實驗研究
　　 目的:觀察補腎降壓方對自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneous hypertensive rat,SHR)血壓、心率及心室肥厚的影響，并探討其對microRNA-1調(diào)控SHR心室肥厚ERK信號通路的影響。
　　 方法:以12周齡WKY大鼠為對照，將12周齡SHR大鼠隨機分為SHR空白組、補腎大劑量組、補腎中劑量組、補腎小劑量組、卡托普利組，連續(xù)灌胃8周，每2周采用套尾法測定

5、SHR清醒狀態(tài)下尾動脈收縮壓、心率。在22周齡時處死動物，觀察心肌組織病理學切片，計算左心室質(zhì)量指數(shù)，Rea-1 time PCR檢測心肌BDNF，Ras，ERK1/2，c-fox mRNA的表達，Western blot檢測心肌BDNF，Ras，ERK1/2，c-fox的蛋白表達，qRT-PCR檢測大鼠左心室心肌組織miRNA-1表達。
　　 結(jié)果:(1)血壓:卡托普利組及補腎大、中、小劑量組分別與SHR空白組相比較，血壓均有

6、不同程度的降低，差異有統(tǒng)計學性意義(P＜0.05)。其中卡托普利組降壓幅度明顯，與補腎中、小劑量組相比差異有統(tǒng)計學性意義(P＜0.05)，而與補腎大劑量組比較則無差異(P=0.257)。
　　 (2)心率:與SHR空白組相比較，補腎大劑量組心率下降幅度明顯，差異有統(tǒng)計學性意義(P＜0.01)，而其余各組心率下降不顯著。與卡托普利組相比，補腎大劑量組心率下降明顯，差異有統(tǒng)計學性意義(P＜0.05)，而其余各組心率下降不顯著。

7、>　　 (3)左心室心肌質(zhì)量指數(shù):與WKY組相比，SHR空白組、卡托普利組及補腎降壓方大、中、小劑量組均顯著升高，差異具有顯著統(tǒng)一學意義(P＜0.01);與SHR空白組相比，WKY組出現(xiàn)顯著性差異，具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，而卡托普利組及補腎降壓方大劑量組也顯示有差異，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);與卡托普利組相比，WKY組顯著降低，差異具有顯著的統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，而SHR空白組顯著增加，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜

8、0.05)。
　　 (4) BDNF，Ras，ERK1/2及c-fox mRNA:①在BDNF mRNA表達方面，與WKY組比較，SHR空白組、卡托普利組以及補腎大、中、小劑量組心臟BDNFmRNA含量均有顯著升高（P＜0.01）;與SHR空白組比較，WKY組、卡托普利組與補腎大劑量組心臟BDNFmRNA含量均有顯著降低（P＜0.01），補腎中劑量組含量也降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，補腎小劑量未見顯著性差異（P＞0.

9、05）;與卡托普利組比較，WKY組、SHR空白組及補腎中、小劑量BDNFmRNA含量顯著升高，差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，補腎大劑量組含量也升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 ②在Ras mRNA表達方面，與WKY組比較，SHR空白組以及補腎小劑量組心臟Ras mRNA含量均有顯著升高(P＜0.01)，補腎大、中劑量組升高(P＜0.05)，而卡托普利組未見顯著性差異(P＞0.05);與SHR空白組比較，

10、WKY組、卡托普利組與補腎大、中劑量組心臟Ras mRNA含量均有顯著降低(P＜0.01)，補腎小劑量組含量無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);與卡托普利組比較，SHR空白組及補腎小劑量Ras mRNA含量顯著升高，差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，WKY組、補腎大、中劑量組含量也升高，但差異無統(tǒng)計學意義。
　　 ③在ERK1/2 mRNA表達方面，與WKY組比較，SHR空白組以及補腎小劑量組心臟ERK1/2 mRNA含量均有顯

11、著升高（P＜0.01），補腎大、中劑量組升高（P＜0.05），而卡托普利組未見顯著性差異(P＞0.05);與SHR空白組比較，WKY組、卡托普利組與補腎大、中劑量組心臟ERK1/2 mRNA含量均有顯著降低（P＜0.01），補腎小劑量組含量無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;與卡托普利組比較，SHR空白組及補腎小劑量ERK1/2 mRNA含量顯著升高，差異具有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01），WKY組、補腎大、中劑量組含量也升高，但差異無統(tǒng)計學

12、意義(P＞0.05)。
　　 ④在c-fox mRNA表達方面，與WKY組比較，SHR空白組、卡托普利組以及補腎大、中、小劑量組心臟c-fox mRNA含量均有顯著升高(P＜0.01);與SHR空白組比較，WKY組、卡托普利組與補腎大、中、小劑量組心臟c-fox mRNA含量均有顯著降低(P＜0.01);與卡托普利組比較，WKY組、SHR空白組及補腎大、中、小劑量c-fox mRNA含量顯著升高，差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.

13、01)。
　　 (5)mirRNA-1:與WKY組比較，卡托普利組未見統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，而SHR空白組及補腎大、中、小劑量組均顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);與SHR空白組比較，WKY組、卡托普利組與補腎大、中、小劑量組心臟mirRNA-1表達均顯著升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);與卡托普利組比較，WKY組與補腎大劑量差異未見統(tǒng)計學意義（P＞0.05），而SHR空白組及補腎中、小劑量組均顯著降低

14、，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:(1)補腎降壓方能夠在SHR模型上穩(wěn)定血壓，減慢心率;(2)補腎降壓方能在一定程度上逆轉(zhuǎn)心室肥厚;(3)高血壓心室肥厚可能與下調(diào)microRNA-1水平進而促使ERK信號通路及其關(guān)鍵靶標過表達有關(guān);(4)補腎降壓方逆轉(zhuǎn)高血壓心室肥厚的作用機制可能與上調(diào)microRNA-1水平進而抑制ERK信號通路及其關(guān)鍵靶標過表達有關(guān);(5)補腎降壓方各劑量組之間呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性，且大劑