維拉帕米對(duì)脊髓重度損傷神經(jīng)保護(hù)作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　脊髓損傷是導(dǎo)致殘疾的主要原因。其中包括原發(fā)性和繼發(fā)性損傷兩種機(jī)制。其中，鈣離子失衡是繼發(fā)性損傷的機(jī)制之一。維拉帕米是一種鈣離子通道阻滯劑，可以通過(guò)抑制細(xì)胞膜上鈣離子通道發(fā)揮減少鈣離子內(nèi)流。目前，維拉帕米對(duì)脊髓神經(jīng)系統(tǒng)損傷后是否發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用尚無(wú)相關(guān)研究報(bào)道。本研究觀察維拉帕米干預(yù)后大鼠損傷脊髓的7.0T-MRI成像特征，并應(yīng)用DTI掃描觀察其變化特征。通過(guò)損傷脊髓的組織病理學(xué)研究觀察脊髓神經(jīng)元存活數(shù)及 GFAP表達(dá)的

2、情況。探討維拉帕米在損傷脊髓神經(jīng)中的保護(hù)作用。為 SCI動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究提供一定的實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法，探索脊髓損傷治療的新方法。
　　方法：
　?、沤⒋笫骃CI模型。將42只SD大鼠隨機(jī)分組，采用改良Allen's法建立大鼠脊髓重度損傷模型，隨機(jī)分成空白對(duì)照組和維拉帕米治療組，每組18只，假手術(shù)組6只。采用BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分法，SCI前及SCI后1天、2周和4周評(píng)估大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能。⑵檢測(cè)維拉帕米治療SCI后大鼠脊髓影像學(xué)改變。術(shù)后

3、1天、2周和4周分別行常規(guī)MRI和DTI檢查。⑶檢測(cè)維拉帕米治療 SCI后大鼠脊髓組織病理學(xué)改變。采用尼氏染色觀察各組大鼠脊髓神經(jīng)元的表達(dá)，免疫熒光檢測(cè)GFAP情況。
　　結(jié)果：
　?、偌偈中g(shù)組BBB評(píng)分均高于對(duì)照組及維拉帕米治療組(P<0.001)。SCI后1天，對(duì)照組及治療組所有大鼠評(píng)分為0分。隨后時(shí)間變化評(píng)分呈逐漸升高，治療組與對(duì)照組比較評(píng)分升高程度增高(P<0.001)。②SCI后1天及2周，T2WI表現(xiàn)為SCI區(qū)域

4、與周圍組織邊界不清的高信號(hào)影；SCI后4周，SCI區(qū)為邊界清楚信號(hào)影，對(duì)照組損傷中心有不規(guī)則橢圓形高信號(hào)影；治療組SCI中心點(diǎn)狀高信號(hào)影。③FA成像，在2周和4周時(shí)，對(duì)照組FA均降低(P<0.01)。對(duì)照組2周及4周較1天時(shí)FA值降低(P<0.01)。ADC圖像對(duì)照組在4周的ADC測(cè)量值較治療組有升高(P<0.01)；對(duì)照組比較各個(gè)時(shí)間點(diǎn)逐步升高，(P<0.01)；治療組2周與1天、4周有明顯升高(P<0.01)。④尼氏染色神經(jīng)元細(xì)胞光

5、鏡下觀察呈現(xiàn)深藍(lán)色顆粒，對(duì)照組與治療組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均減少(P<0.01)。對(duì)照組2周及4周時(shí)均與1天比較神經(jīng)細(xì)胞減少(P<0.01)。光鏡下觀察對(duì)照組2周與4周時(shí)神經(jīng)元細(xì)胞排列均紊亂。⑤對(duì)照組及治療組與假手術(shù)組比較GFAP均明顯升高(P<0.01)。對(duì)照組在4周時(shí)間點(diǎn)GFAP測(cè)量值較治療組有升高(P<0.01)。對(duì)照組GFAP測(cè)量值呈逐步升高(P<0.01)。治療組隨時(shí)間變化呈現(xiàn)先上升后下降變化，在2周時(shí)達(dá)到頂峰。
　　結(jié)論：