針刺對大鼠慢性脊髓損傷神經遞質和營養(yǎng)因子表達作用的實驗研究.pdf

1、慢性壓迫性脊髓損傷(Chronic compressive spinal cord injury, SCI)是中老年的常見多發(fā)疾病之一,多可導致病人截癱和四肢癱,使患者喪失勞動和生活能力,已成為一個社會問題。受損傷的脊髓神經細胞能否再生修復脊髓功能,以及SCI的恢復機理,一直是倍受世界關注的熱點課題,也是國際脊髓信托基金會制定的 SCI的研究方向。
　　慢性SCI傳統(tǒng)的治療方法以手術解除壓迫為主,雖能明顯改善癥狀,但對于形成的繼發(fā)

2、損傷反應屹今尚無滿意的療效。祖國醫(yī)學,尤其是針刺在SCI的治療和研究方面做了大量的工作。長期大量的臨床實踐證明,針刺對改善脊髓損傷后導致的感覺、運動以及括約肌功能障礙及其它合并癥,例如肌痙攣性疼痛、二便功能障礙和下肢癱瘓等都有毋庸置疑的療效,是治療SCI的重要手段。
　　但是,關于針刺治療脊髓損傷的機理的研究目前還處于萌芽階段。針刺治療慢性脊髓損傷減壓還缺乏相應的實驗依據。本實驗通過探索脊髓受壓后以及脊髓減壓和電針治療后運動神經遞

3、質乙酰膽堿的合成酶―膽堿乙酰轉移酶(Choline acetyltransferase,ChAT)和腦源性神經營養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic,BDNF)及其受體 TrkC的變化規(guī)律,以及它們對脊髓功能的影響,以期明了脊髓減壓和電針治療慢性脊髓損傷的機理和本質。
　　取60只2月齡Wistar大鼠,隨機分為對照組(即A組)10只;模型組50只。模型組造成中度壓迫(40％-50%)慢性脊髓損傷模型。兩個

4、月再隨機分為五組:B組,為持續(xù)壓迫組;C組,為減壓組;D組、E組、F組均為手術減壓后,進行不同電流電針治療。應用聯(lián)合行為評分(Combined behavioral score,CBS)評價脊髓神經運動功能。三月后處死動物,進行形態(tài)學觀察,免疫組織化學染色等方法檢測膽堿乙酰轉移酶和腦源性神經營養(yǎng)因子及其受體TrkC基因表達的變化。
　　結果:(1)初次術后第60d攝X線側位片,證實實驗組動物椎管侵占率40%-50%(平均44.5%

5、)。CBS功能評分實驗開始前所有動物的神經功能均為正常,60d時動物模型組均可見功能障礙,B、C、D、E、F組CBS值增加,與A組比有明顯差異。90d時D組和F組動物CBS評分變化不大,與C組CBS比較差異無顯著性,E組動物CBS評分明顯減少,脊髓功能恢復好,功能評分優(yōu)于C組,CBS值比較差異具有顯著性。(2)ChAT免疫組織化學染色顯示,脊髓受壓后,B組ChAT陽性染色神經細胞數(shù)減少,染色強度減弱;減壓C組陽性染色的神經元較B組增多,

6、染色強度增加;E組陽性染色的神經元計數(shù)較減壓組增多更明顯,染色強度增加;E組與C組、D組、F組比較有顯著差異(P<0.05);ChAT陽性細胞計數(shù)與CBS值呈負相關關系(r=-0.975,P=0.05)。(3)BDNF及TrkC免疫組化染色顯示,脊髓受到壓迫后,BDNF及TrkC在脊髓神經元及膠質細胞陽性染色增多;BDNF在壓迫嘴端前角細胞及空洞周圍的神經元細胞和膠質細胞均呈強陽性染色;TrkC在壓迫尾端表達明顯增加;C組BDNF及Tr

7、kC在壓迫段神經元細胞呈弱陽性染色,且陽性膠質細胞減少;E組較C組、D組及F組在壓迫段神經細胞及膠質細胞BDNF及TrkC陽性染色明顯減弱,陰性膠質細胞亦明顯較少。
　　結論:(1)本實驗采用脊髓后路漸進性壓迫模型,可以模擬慢性壓迫性脊髓病(chronic compressive cervical myelopathy,CCM)發(fā)病的實際情況,說明動物模型是成功的。(2)脊髓受壓可以導致ChAT表達下降;BDNF和TrkC在壓迫節(jié)

8、段及壓迫嘴、尾端的神經元及膠質細胞表達增強。(3)脊髓減壓和電針治療可以促進ChAT陽性染色細胞明顯增多,表達增強;電針亦能促進實驗動物脊髓運動功能恢復;且 ChAT增多與神經功能恢復有關。(4)電針治療可以促使 BDNF和TrkC陽性染色的神經元恢復弱陽性表達,這可能說明BDNF及其受體介導了電針治療脊髓損傷的機制。(5)電針治療可能是通過促進ChAT表達升高及活性增加,及影響B(tài)DNF及其受體的表達起治療作用,二者之間存在著相關關系,