CD44聯(lián)合Prpc作為胃癌干細胞的初步研究.pdf

1、研究背景:胃癌是世界上特別是東亞非常常見的惡性腫瘤之一。每年的新發(fā)病例和因病死亡病例都是一個非常高的數(shù)字。隨著醫(yī)學的進步，各項疾病的診療手段不斷的出現(xiàn)。胃癌由于胃鏡和CT等手段的進步，越來越多的早期胃癌得到發(fā)現(xiàn)。但由于胃癌的起病隱匿，癥狀不甚明顯，胃鏡等篩查手段在中國難以大面積鋪展開來，很多患者發(fā)現(xiàn)胃癌時往往以進入進展期，已經(jīng)發(fā)生侵襲和轉移，失去了手術的最佳機會，放化療的效果也不甚理想。而目前的研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的發(fā)生發(fā)展侵襲和轉移都跟腫瘤

2、干細胞有著千絲萬縷的關系。為了解開胃癌的奧秘，為了提高胃癌的診斷率和術后生存率，有必要對胃癌腫瘤干細胞及其相關機制進行研究。
　　研究目的:研究CD44和Prpc在胃癌中的分布和表達情況，分析胃癌與兩種基因在增殖，侵襲轉移及預后方面的關系。并進一步探究其中的分子機制和信號轉導通路。
　　研究方法:
　　1、收集胃癌病例進行隨訪。利用組織免疫熒光和免疫組化技術檢測CD44，Prpc在胃正常粘膜組織中和胃癌組織中的分布和表

3、達情況。并分析兩種蛋白與胃癌臨床病理之間的關系。
　　2、應用實時定量PCR和蛋白免疫印跡技術篩選CD44和Prpc高表達的胃癌細胞系。通過RNA干擾技術構建sh-RNA質(zhì)粒和相應的表達質(zhì)粒，分析沉默Prpc和高表達對EMT相關蛋白的影響。通過平板克隆形成實驗觀察Prpc對腫瘤增殖能力的影響。通過Transwell實驗檢測Prpc對胃癌細胞侵襲和遷徙能力的影響。
　　3、收集胃癌病人和健康人的新鮮血液，采用流式細胞儀檢測分析

4、CD44和Prpc雙陽性細胞和單陽性細胞的比例情況。
　　研究結果:
　　1、免疫組化和組織免疫熒光顯示:CD44和Prpc在胃癌中的陽性表達率明顯高于胃正常粘膜組織。CD44和Prpc的表達同胃癌的浸潤深度，淋巴結轉移和腫瘤分期正相關。
　　2、CD44和Prpc在胃癌細胞系MGC823中相對表達量較高。沉默MGC823中的Prpc的表達可以降低胃癌細胞的侵襲轉移能力，克隆形成能力，降低N-cadherin的表達。<

5、br>　　3、胃癌患者中，血液中的CD44和Prpc雙陽性細胞和單陽性細胞都較健康人群顯著性增加。
　　研究結論:
　　1.CD44和Prpc的表達與胃癌的發(fā)生發(fā)展相關，可以作為腫瘤侵襲、轉移及惡性程度的指標，以及未來有可能成為判斷預后的指標。
　　2.抑制Prpc基因的表達，可以對胃癌細胞的侵襲和轉移，增殖能力進行抑制。同時Prpc的表達還可以影響EMT相關蛋白的表達。
　　3.循環(huán)系統(tǒng)中存在CD44和Prpc