CD44反義基因逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞免疫逃逸的實驗研究.pdf

1、目的:為了探討切斷CD44介導的腫瘤免疫逃逸途徑,增強機體的抗腫瘤作用,該研究采用反義基因技術,設計并合成了CD44反義寡核苷酸(ASODN),并進行硫代化修飾,以脂質(zhì)體包裹,形成反義寡核苷酸-脂質(zhì)體復合物,轉(zhuǎn)導入人低分化黏液腺胃癌細胞系MGC80-3細胞,從基因-蛋白-細胞效應多層次水平,觀察CD44反義基因下調(diào)CD44表達的作用,觀察CD44ASODN對腫瘤細胞Fas及凋亡相關基因bcl-2的影響,提高CD3AK免疫效應細胞的識別殺

2、傷能力,進一步闡明CD44介導免疫逃逸的詳細機制,揭示CD44分子介導免疫抑制和反義CD44逆轉(zhuǎn)免疫抑制作用的分子機制,逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫逃逸,為CD44反義基因的腫瘤生物治療,提供新的理論和實驗依據(jù).結論:1.人胃癌細胞系MGC80-3高表達的CD44分子,與其配體低分子量HA結合后,使細胞表面同時高表達的Fas分子表達下調(diào);細胞內(nèi)凋亡抵抗基因bcl-2表達上調(diào),抑制了CD3AK細胞FasL和抗Fas抗體誘導的細胞凋亡;同時增殖活性增高,在

3、體外表現(xiàn)出明顯的免疫抑制作用.2.CD44ASODN轉(zhuǎn)導MGC80-3細胞后,有效地封閉并抑制CD44mRNA和CD44蛋白的表達.3.在CD44配體低分子量HA存在的環(huán)境中,CD44ASODN可有效地增加MGC80-3細胞Fas分子的表達,并顯著地增加MGC80-3細胞對FasmAb誘導凋亡的敏感性.4.CD44ASODN可有效地抑制MGC80-3細胞的增殖活性.5.CD44ASODN增強MGC80-3細胞對CD3AK的殺傷敏感性,并