

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、腫瘤干細(xì)胞假說(shuō)認(rèn)為腫瘤中存在一小部分亞群細(xì)胞,其生長(zhǎng)特性類(lèi)似與正常干細(xì)胞,具有自我更新,維持腫瘤生長(zhǎng)和保持腫瘤異質(zhì)性的能力。雖然該理論遠(yuǎn)未成熟,而且還存有諸多科學(xué)問(wèn)題亟待解決,但經(jīng)過(guò)學(xué)者們不懈努力,越來(lái)越多的證據(jù)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果均證實(shí)了腫瘤干細(xì)胞的存在。2009年,Takaishi等從胃癌細(xì)胞系中分離得到了CD44表達(dá)陽(yáng)性的細(xì)胞亞群,這些CD44+細(xì)胞具有腫瘤干細(xì)胞自我更新和腫瘤異質(zhì)性的能力,還能夠?qū)?、放療誘導(dǎo)的細(xì)胞程序性凋亡產(chǎn)生抵抗作用。
2、
目的:選擇CD44作為分離標(biāo)記,研究其在胃癌原發(fā)灶及轉(zhuǎn)移灶組織內(nèi)的表達(dá),通過(guò)酶消化聯(lián)合化療藥物篩選法分離胃癌干細(xì)胞,并對(duì)原代分離培養(yǎng)的胃癌干細(xì)胞的表型進(jìn)行檢測(cè)。以MicroRNA和CD44之間表達(dá)平衡為突破口,研究應(yīng)激性反應(yīng)原如何作用與這兩者之間平衡影響干細(xì)胞的表型形成,為進(jìn)一步從新的角度揭示胃癌發(fā)生發(fā)展的可能分子機(jī)制,并針對(duì)腫瘤干細(xì)胞為靶點(diǎn),為開(kāi)辟早期診斷、治療胃癌的新途徑奠定方法和理論基礎(chǔ)。
方法:所有
3、細(xì)胞培養(yǎng)均使用10%胎牛血清,加入配好的抗生素液體中(青/鏈霉素100U/mL、100μg/mL)。細(xì)胞表型檢測(cè)使用流式細(xì)胞儀(BD FAcscalibur)分選,未加熒光標(biāo)記一抗的腫瘤細(xì)胞作為空白對(duì)照。western blot檢測(cè)CD44、Lin28在胃癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶的表達(dá)。半定量RT-PCR及實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)miR-373的表達(dá),雙螢光素酶檢測(cè)分析STAT3和AP-1表達(dá)水平,實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)異丙腎上腺素處理后胃癌細(xì)胞系表面標(biāo)
4、記Rex-1和Nanog表達(dá),Western blot結(jié)果表明β-腎上腺素受體在胃癌原發(fā)灶及轉(zhuǎn)移灶表達(dá)。
結(jié)果:雖然胃癌原發(fā)灶及轉(zhuǎn)移灶內(nèi)均存在著CD44+亞群細(xì)胞,但是相比原發(fā)灶,轉(zhuǎn)移灶內(nèi)CD44+亞群細(xì)胞的比例顯著上調(diào)(約30倍)。Western blot檢測(cè)從蛋白水平上證實(shí)了CD44、Lin28在胃癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶組織內(nèi)存在著表達(dá)差異?;熕幬锖Y選培養(yǎng)結(jié)果顯示,CD44+亞群細(xì)胞能夠?qū)W沙利鉑產(chǎn)生抵抗,并且能夠逃避奧沙
5、利鉑誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞程序性死亡。篩選培養(yǎng)后CD44+細(xì)胞不但具有強(qiáng)大的分離增殖能力,而且能夠在體外培養(yǎng)形成球體克隆。
miR-373在胃癌原發(fā)灶及轉(zhuǎn)移灶組織存在表達(dá)差異。miR-373在原發(fā)灶內(nèi)表達(dá)的量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其在轉(zhuǎn)移灶內(nèi)的表達(dá)量。miR-373可能通過(guò)正向調(diào)控E-cadherin影響EMT,從而影響腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。miR-373能夠在體內(nèi)和體外抑制CD44的表達(dá),影響胃癌干細(xì)胞的表型轉(zhuǎn)化。miR-373的啟動(dòng)子區(qū)域含有
6、STAT3和AP-1結(jié)合位點(diǎn),其上游信號(hào)通路活化后,通過(guò)激活STAT3信號(hào)通路和JNK/SAPK信號(hào)通路,抑制miR-373的功能,間接地促進(jìn)CD44的表達(dá),使細(xì)胞表型向胃癌干細(xì)胞的方向發(fā)生偏移。應(yīng)激性反應(yīng)原與其受體結(jié)合后,激活β腎上腺素受體-cAMP-PKA信號(hào)通路,從而上調(diào)STAT3和c-Jun的表達(dá)水平,影響miR-373的剪切及成熟,間接地抑制CD44的表達(dá)及胃癌干細(xì)胞的表型形成。
結(jié)論:轉(zhuǎn)移灶內(nèi)CD44+亞群細(xì)胞
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- CD44聯(lián)合Prpc作為胃癌干細(xì)胞的初步研究.pdf
- 進(jìn)展期胃癌證素特征與胃癌干細(xì)胞相關(guān)基因CD133、CD44表達(dá)間的關(guān)系.pdf
- 轉(zhuǎn)移相關(guān)基因CD44在胃癌中表達(dá)的研究.pdf
- 骨橋蛋白與CD44在結(jié)石形成中的作用.pdf
- 健脾養(yǎng)胃方對(duì)CD44(+)胃癌干樣細(xì)胞耐藥的影響.pdf
- 人角膜上皮細(xì)胞CD44表達(dá)的研究.pdf
- 轉(zhuǎn)移相關(guān)基因CD44和胃癌關(guān)系的研究.pdf
- 胃癌組織中CD44和CD133的表達(dá)及其臨床意義.pdf
- SALL4調(diào)控CD44在胃癌中的作用和機(jī)制研究.pdf
- 薏苡仁酯對(duì)胃癌BGC-823細(xì)胞侵襲、遷移能力及CD44、CD133表達(dá)的影響.pdf
- CD44及CD44v6在肺癌中的表達(dá)研究.pdf
- CD44和ABCG2在胃癌中的表達(dá)及意義.pdf
- GKN2對(duì)CD44(+)SGC7901胃癌細(xì)胞的抑制作用研究.pdf
- 健脾養(yǎng)胃方含藥血清對(duì)CD44(+)胃癌干樣細(xì)胞分化的影響.pdf
- 谷氨酰氨合成酶(GS)在CD44陽(yáng)性結(jié)直腸癌干細(xì)胞中作用的初步研究.pdf
- CD44、HIF-1α在胃癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- 欖香烯對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC--7901的體外生長(zhǎng)及CD44v6、CD44的影響.pdf
- 干細(xì)胞標(biāo)記CD133、CD166和CD44在大腸癌中表達(dá)的免疫組化研究.pdf
- CD133、CD34、CD44作為人肺腺癌腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物的研究.pdf
- CD44在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論