益智仁健腦的神經(jīng)保護(hù)作用藥效物質(zhì)篩選.pdf

1、中藥益智仁，又名益智、益智子，姜科、山姜屬的多年生草本植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的果實(shí)，收載于《中國藥典》2015版，為衛(wèi)生部101個(gè)首批藥食同源品種，為我國四大南藥之一。益智具有補(bǔ)腎、攝唾、固精、縮尿的功效。按照“腦為髓?！钡恼f法，我們查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎藥物多有神經(jīng)保護(hù)、提高智力的作用。而益智仁，民間稱謂“益智”，有用于提高記憶力的記載。因此，我們對益智中有效成分進(jìn)行提取分離鑒定和神經(jīng)保護(hù)藥效篩選，并進(jìn)行機(jī)制

2、探討。
　　我們從益智仁中提取了白楊素、圓柚酮、楊芽黃素等6種主要成分。采用我們課題組前期構(gòu)建啟動(dòng)子篩選模型進(jìn)行初篩的結(jié)果顯示:白楊素的最佳濃度是1μM，可以將NF（神經(jīng)因子）啟動(dòng)子上調(diào)2.21倍。圓柚酮的最佳濃度是1μM，可以將NF啟動(dòng)子上調(diào)2.3倍。楊芽黃素的最佳濃度是1μM，可以將NF啟動(dòng)子上調(diào)1.6倍。在此基礎(chǔ)上我們以大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(rMSCs)為模型細(xì)胞進(jìn)行神經(jīng)保護(hù)功能的進(jìn)一步驗(yàn)證。實(shí)時(shí)定量PCR的結(jié)果顯示，白楊素

3、、圓柚酮這2種單體在1μM的濃度下，均能夠一定程度上促進(jìn)五種神經(jīng)標(biāo)志物的轉(zhuǎn)錄水平，并體現(xiàn)出一定的劑量依賴性。在給藥72h的時(shí)候mRNA的轉(zhuǎn)錄水平達(dá)到高峰，效果優(yōu)于陽性對照（全反式維甲酸）。免疫熒光的實(shí)驗(yàn)表明，在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞被誘導(dǎo)72h的時(shí)候，五種神經(jīng)標(biāo)志物所對應(yīng)的蛋白也均被檢測到。由此可見，這兩種化合物具有一定的誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的能力。
　　本研究通過篩選，初步確認(rèn)了來自中藥益智仁的兩種可以誘導(dǎo)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)