阿霉素脂質(zhì)體與致孔肽相互作用的研究.pdf

1、目的：
　　阿霉素（doxorubicin, DOX）又稱多柔比星，是蒽環(huán)霉素類抗生素。在上世紀(jì)60年代初首次從一種鏈霉菌中分離出來(lái)。阿霉素對(duì)惡性腫瘤的治療范圍很寬。廣泛用于治療血液系統(tǒng)癌癥、實(shí)體瘤和肉瘤。在上世紀(jì)60年代末，阿霉素在臨床試驗(yàn)中則顯示出了抗腫瘤的療效，但是對(duì)正常細(xì)胞有毒性作用，因此提高藥物的靶向性和降低藥物的毒性是研究的重點(diǎn)。
　　脂質(zhì)體（liposome）是人工制備的由磷脂雙分子定向排列而成的封閉囊泡，具有

2、良好的靶向作用。脂質(zhì)體作為藥物輸送系統(tǒng)，具有改善藥物的藥代動(dòng)力學(xué)、體內(nèi)分布和降低毒性的優(yōu)點(diǎn)。近年來(lái)，相關(guān)研究顯示，用脂質(zhì)體載運(yùn)的阿霉素不僅抗腫瘤作用類似或稍強(qiáng)于游離的阿霉素，而且能顯著減少心臟毒性作用，治療范圍得到擴(kuò)大。對(duì)脂質(zhì)體進(jìn)行靶向修飾更能增強(qiáng)藥效降低毒副作用。
　　致孔肽（pore-forming peptide）是一種線性肽，具有α螺旋構(gòu)象，廣泛存在于自然界中。它可以誘導(dǎo)脂質(zhì)膜的滲透，在膜的表面自組裝形成孔，使得小分子物質(zhì)

3、從膜內(nèi)流出。將致孔肽與脂質(zhì)體載體連接，促使藥物分子從脂質(zhì)體內(nèi)快速釋放到腫瘤細(xì)胞外，增強(qiáng)藥物在腫瘤部位的聚集。
　　本文通過(guò)硫酸銨梯度法制備了阿霉素脂質(zhì)體載體。并對(duì)其外觀形態(tài)、粒徑、包封率進(jìn)行了穩(wěn)定性考察，篩選出理化性質(zhì)優(yōu)良的處方。通過(guò)考察脂質(zhì)體載體的熒光泄露，考察脂質(zhì)體載體與致孔肽的相互作用特征。
　　方法：
　　通過(guò)查閱文獻(xiàn)及實(shí)驗(yàn)研究，確定了阿霉素脂質(zhì)體的制備方法。采用薄膜分散法制備空白脂質(zhì)體，采用硫酸銨梯度法進(jìn)行藥

4、物裝載。通過(guò)測(cè)定載藥脂質(zhì)體的粒徑、電位、包封率對(duì)載體進(jìn)行表征。
　　以粒徑、多分散系數(shù)、包封率、釋放度為考察指標(biāo)，重點(diǎn)研究了載體的物理化學(xué)穩(wěn)定性（以粒徑、多分散系數(shù)、包封率為指標(biāo)）和載藥穩(wěn)定性（以釋放度為指標(biāo)），篩選出最佳的制劑處方。
　　使用高通量實(shí)時(shí)熒光分析系統(tǒng)，考察脂質(zhì)體載體的熒光泄露率，評(píng)價(jià)脂質(zhì)體載體與致孔肽作用能力，篩選出合適的脂質(zhì)體載體和致孔肽。
　　結(jié)果：
　　根據(jù)不同脂材配比，不同的制備條件，制備

5、了7種阿霉素脂質(zhì)體。阿霉素脂質(zhì)體載體粒徑在110 nm~150 nm之間，分布均勻，成正態(tài)單峰分布。PDI小于0.3，阿霉素脂質(zhì)體載體的zeta電位均呈負(fù)電性。阿霉素脂質(zhì)體載體的包封率在83％~99%之間。
　　POPC-DOX放置30天后，脂質(zhì)體載體顏色變深，出現(xiàn)分層，粒徑、PDI、包封率變化較大，表明POPC-DOX脂質(zhì)體載體穩(wěn)定性較差。其余6種脂質(zhì)體載體放置60天后，脂質(zhì)體載體外觀無(wú)分層，色澤均一，粒徑、PDI、包封率變化較

6、小，表明剩余6種脂質(zhì)體載體有較好的穩(wěn)定性。
　　釋放度測(cè)定結(jié)果表明，脂質(zhì)體載體在三種釋放介質(zhì)中，累積釋放率相對(duì)較低，穩(wěn)定性較好。
　　通過(guò)熒光泄露實(shí)驗(yàn)，建立了脂質(zhì)體載體與致孔肽相互作用的評(píng)價(jià)方法，通過(guò)考察阿霉素?zé)晒庑孤叮u(píng)價(jià)致孔肽作用于脂質(zhì)體載體的通透性能力。
　　結(jié)論：
　　脂質(zhì)體載體的制備方法簡(jiǎn)便，并且制備時(shí)間短，經(jīng)過(guò)多個(gè)批次脂質(zhì)體表征結(jié)果驗(yàn)證，此制備方法的重現(xiàn)性較好，包封率測(cè)定方法簡(jiǎn)便。建立了脂質(zhì)體載體與致