B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤患者p57KIP2基因甲基化狀態(tài)及臨床意義的研究.pdf

1、目的：
　　探討B(tài)細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（B cell non-Hodgkin's Lymphoma,B-NHL）患者p57KIP2基因甲基化狀態(tài)及其臨床意義，為尋找新的治療靶點奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.一般資料2012年1月到2016年5月就診于山西大醫(yī)院腫瘤內(nèi)三科的36例非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's Lymphoma,NHL)患者，男性20例，女性16例，男：女為1:0.8，年齡19-74歲，中位年

2、齡51歲。所有患者均經(jīng)淋巴結(jié)活檢，有明確的病理形態(tài)學(xué)、免疫組織化學(xué)診斷，診斷參照2008版淋巴造血組織腫瘤WHO分類標(biāo)準(zhǔn)。其中 B-NHL32例， T-細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤(T cell non-Hodgkin's Lymphoma,T-NHL）4例。B-NHL患者中彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(diffuse large B celllymphoma,DLBCL）21例，套細(xì)胞淋巴瘤（Mantle Cell Lymphoma,MCL）6例，邊緣區(qū)

3、淋巴瘤（Marginal Zone Lymphoma,MZL）4例，小淋巴細(xì)胞淋巴瘤（Small Lymphocytic Lymphoma,SLL）1例。T-NHL患者中T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤/白血病（T Lymphoblastic Lymphoma/Leukemia,TLBL）2例，血管免疫母細(xì)胞淋巴瘤(Angioimmunoblastic T Lymphoma,AITL)2例。以10例淋巴結(jié)炎組織標(biāo)本作為對照組。治療方案及療效評估：DL

4、BCL治療參照《中國彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤診斷與治療指南(2013年版)》，采用類R-CHOP（利妥昔單抗、環(huán)磷酰胺、蒽環(huán)類、長春新堿和地塞米松）方案治療；MCL、MZL、AITL參照NCCN臨床實踐指南，MCL予HyperCAVD（環(huán)磷酰胺、長春新堿、阿霉素、潑尼松組成的A方案和甲氨蝶呤、阿糖胞苷構(gòu)成的B方案交替）為主方案治療，MZL、AITL采用類CHOP方案治療， T-LBL采用BFM90方案。療效評估參照WHO淋巴瘤療效評價標(biāo)準(zhǔn)。隨

5、訪：所有患者隨訪至2017年1月1日，14例死亡，1例失訪。2.標(biāo)本采集收集治療前活檢的新鮮無菌淋巴結(jié)組織標(biāo)本，-80℃凍存?zhèn)溆谩?.研究方法用組織DNA提取試劑盒提取患者淋巴結(jié)組織中DNA，亞硫酸氫鈉處理DNA后，應(yīng)用甲基化特異性PCR（methylation specific PCR,MSP）結(jié)合變性高效液相色譜（denatured high performance liquid chromatography,DHPLC）技術(shù)，檢測

6、p57KIP2基因甲基化。4.統(tǒng)計處理應(yīng)用SPSS22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理：用獨立樣本的Mann-Whitney U檢驗比較病例組和對照組間組織標(biāo)本中p57KIP2基因甲基化狀態(tài)；Fisher卡方檢驗分析組織中p57KIP2基因甲基化狀態(tài)與臨床表現(xiàn)間的關(guān)系；采用Kaplan-Meier生存分析法分析B-NHL患者的生存情況。P＜0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1. NHL患者瘤組織p57KIP2甲基化率為2

7、7.8％（10/36），10例淋巴結(jié)炎患者的淋巴結(jié)組織無p57KIP2基因甲基化；NHL組織中p57KIP2甲基化率高于淋巴結(jié)炎患者淋巴結(jié)組織中p57KIP2甲基化率。B-NHL患者瘤組織中p57KIP2甲基化率為31.2%（10/32），T-NHL患者瘤組織未見p57KIP2基因甲基化；B-NHL患者瘤組織中p57KIP2甲基化率高于T-NHL患者瘤組織中p57KIP2甲基化率。DLBCL、MCL、MZL患者瘤組織中p57KIP2基因

8、甲基化分別為33.3%（7/21）、33.3%（2/6）、25%（1/4）， SLL患者瘤組織未見p57KIP2基因甲基化。2.乳酸脫氫酶（LDH）高水平組中p57KIP2基因甲基化（8/15）高于LDH正常組（2/17），差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.021，P＜0.05）。p57KIP2基因甲基化與患者的年齡、性別、淋巴結(jié)外累及、B癥狀、骨髓有無累及、臨床分期、分型、IPI評分、血清β2-MG水平、淋巴細(xì)胞數(shù)、Hb水平、Plt數(shù)、增殖指

9、數(shù)（Ki-67）、療效等均無明顯相關(guān)，差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。3. p57KIP2基因甲基化與患者的總生存期(OS）無明顯相關(guān)，差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.905）。
　　結(jié)論：
　　1.NHL瘤組織p57KIP2基因甲基化率較高，p57KIP2基因甲基化在淋巴瘤組織有一定特異性；2.B-NHL患者LDH高水平組中p57KIP2基因甲基化較LDH正常組高， p57KIP2基因甲基化狀態(tài)可能與B-NHL患者腫瘤負(fù)荷高相