小窩蛋白-1和E-鈣粘蛋白在食管癌TE1細(xì)胞株中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:
　　1.檢測(cè)小窩蛋白-1（Cav-1）和E-鈣粘蛋白（E-cad）在食管癌TE1細(xì)胞株中的表達(dá)水平。
　　2.探討Cav-1在食管癌轉(zhuǎn)移中的作用及相關(guān)的分子機(jī)制。
　　方法:
　　1.用含10％胎牛血清，1%青霉素和1%鏈霉素的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人食管癌TE1細(xì)胞株。
　　2.化學(xué)合成針對(duì) Cav-1基因3個(gè)不同靶點(diǎn)的3條 siRNA(Cav-1 siRNA1, Cav-1 siRNA2和陰性對(duì)

2、照siRNA),分別轉(zhuǎn)染食管癌TE1細(xì)胞株,以未轉(zhuǎn)染細(xì)胞為空白對(duì)照,轉(zhuǎn)染陰性 siRNA細(xì)胞為陰性對(duì)照。
　　3.用Western blot方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后人食管癌TE1細(xì)胞株中Cav-1及E-cad的表達(dá)水平。
　　4.采用Transwell方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞的遷移、侵襲能力。
　　結(jié)果:
　　1.Cav-1 siRNA使食管癌TE1細(xì)胞株中Cav-1表達(dá)水平降低，E-cad表達(dá)水平升高。
　　2.轉(zhuǎn)染

3、后 Cav-1 siRNA1組和 Cav-1 siRNA2組Cav-1的表達(dá)量與空白對(duì)照組比較p=0.0001,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組比較p=0.2768，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.轉(zhuǎn)染后Cav-1 siRNA1組和Cav-1 siRNA2組E-cad的表達(dá)量與空白對(duì)照組比較，p分別=0.0091和0.0403，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組比較p=0.5804，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.

4、轉(zhuǎn)染Cav-1 siRNA后食管癌TE1細(xì)胞株的遷移、侵襲能力明顯降低，Cav-1 siRNA1組和Cav-1 siRNA2組細(xì)胞的遷移、侵襲能力相比空白對(duì)照組顯著減弱，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5.轉(zhuǎn)染Cav-1 siRNA后Cav-1 siRNA1組的遷移、侵襲能力比Cav-1 siRNA2組弱。
　　結(jié)論:
　　1.在食管癌TE1細(xì)胞株中轉(zhuǎn)染Cav-1 siRNA能有效降低Cav-1表達(dá)水平并減弱細(xì)胞的遷移、侵襲能