膠原交聯(lián)對兔角膜堿燒傷新生血管影響的實驗研究.pdf

1、目的：本研究擬通過觀察兔眼堿燒傷誘導角膜新生血管模型經(jīng)核黃素聯(lián)合紫外光A行角膜膠原交聯(lián)(corneal collagen cross linking，CXL)后新生血管的生長，探索CXL對角膜新生血管的影響及機制。
　　方法：健康家兔60只，隨機分為6組，每組10只，右眼為實驗眼；A組為單純堿燒傷對照組，B、C、D、E、F組為實驗組，其中B組為堿燒傷后即刻標準CXL（標準CXL方法為紫外光光照30分鐘）、C組為堿燒傷后即刻CXL紫

2、外光光照時間15分鐘、D組為堿燒傷后即刻CXL紫外光光照時間45分鐘、E組為堿燒傷后1天標準CXL、F組為堿燒傷后3天標準CXL，表麻下予1 mol/L的氫氧化鈉建立堿燒傷模型及膠原交聯(lián)干預各組模型。堿燒傷模型建成后分別于第4、7、10、14天觀察并記錄角膜新生血管面積、角膜水腫、感染、潰瘍，于第7、14天分別各取5只家兔角膜組織，采用Western-Blotting分析VEGF、MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表達量。
　

3、　結果：1.術后裂隙燈觀察：第14天處死各組家兔，單純堿燒傷對照組10眼中有5只眼（50％）發(fā)生角膜中央基質溶解、后彈力層膨出；實驗組共50只眼，其中有7只眼（14%）出現(xiàn)角膜中央變薄，3只眼（6%）出現(xiàn)角膜溶解，各組均未發(fā)生角膜穿孔。
　　2.角膜新生血管（CRNV）面積比較：第4天：各組間比較無顯著差異（P>0.05）；第7天：各組間比較有顯著差異（P<0.05），其中以A組CRNV面積最大、D組CRNV面積最?。坏?0天：A

4、與D組、A與E組間相比有顯著差異（P<0.05），D、E組CRNV面積較A組顯著減小。第14天：A與D組、B與D組間及F與D組間相比較有顯著差異（P<0.05），D組較A、B、F組的CRNV面積顯著減小。
　　3.Werstern-Blotting檢測VEGF、MMP-2、MMP-9和TIMP-1表達量的比較：在兔眼角膜堿燒傷后第7天，對照組與各實驗組之間VEGF、MMP-2在角膜組織中的表達量無顯著差異（P＞0.05）；MMP-

5、9的表達量在A組顯著低于各個實驗組（P<0.05）；TIMP-1的表達量比較中A組顯著低于D、F組（P<0.05）；在角膜堿燒傷后第14天，對照組A組角膜組織中VEGF、MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表達量均較前上升，其中對照組A組VEGF表達量顯著高于各個實驗組（P<0.05），A組角膜中MMP-2表達量顯著高于B、D、E組（P<0.05）；A組角膜組織中MMP-9、TIMP-1表達量均高于各個實驗組，但未達到顯著差異水平（P