復(fù)方保腎顆粒治療慢性腎小球腎炎的藥效及作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　本研究通過(guò)觀察復(fù)方保腎顆粒對(duì)家兔陽(yáng)離子化牛血清白蛋白（C-BSA）免疫復(fù)合型腎炎模型和大鼠阿霉素腎炎模型的尿蛋白、血肌酐、尿素氮及腎臟結(jié)構(gòu)病理改變的影響，相關(guān)蛋白因子水平的調(diào)節(jié)，探討該藥對(duì)慢性腎小球腎炎（后稱慢性腎炎，CGN）的治療作用，揭示其防治CGN的作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.連續(xù)6周給家兔耳緣靜脈注射陽(yáng)離子化牛血清白蛋白制得腎炎模型，將動(dòng)物分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、醋酸地塞米松組、復(fù)方保腎顆粒

2、1.2g/kg、0.6 g/kg、0.3 g/kg劑量組，灌胃給藥10周后，檢測(cè)動(dòng)物尿蛋白、血清肌酐、尿素氮濃度及腎臟病理等指標(biāo)的變化，免疫組化法檢測(cè)腎臟中白介素-6（IL-6）、細(xì)胞間粘附因子-1（ICAM-1）的蛋白表達(dá)情況，觀察復(fù)方保腎顆粒對(duì)兔C-BSA型腎炎模型的治療作用。
　　2.單次給大鼠尾靜脈注射鹽酸多柔比星5mg/kg，兩周后制得腎炎模型，將動(dòng)物分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、醋酸潑尼松組、復(fù)方保腎顆粒1.5g/kg、

3、0.75 g/kg、0.375 g/kg劑量組，灌胃給藥4周后，檢測(cè)動(dòng)物尿蛋白、血清肌酐、尿素氮濃度及腎臟病理等指標(biāo)的變化，免疫組化法檢測(cè)腎臟中足突裂孔隔膜蛋白（Nephrin）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）的表達(dá)情況，觀察復(fù)方保腎顆粒對(duì)大鼠阿霉素腎炎模型的治療作用。
　　結(jié)果：
　　1.復(fù)方保腎顆粒1.2g/kg劑量組能顯著C-BSA型腎炎家兔的尿蛋白含量（p<0.05或p<0.01）；復(fù)方保腎顆粒1.2g/kg、0.

4、6g/kg劑量組血肌酐含量明顯降低（p<0.01），；復(fù)方保腎顆粒1.2g/kg劑量組（p<0.05）尿素氮含量明顯降低。
　　2.復(fù)方保腎顆粒1.2g/kg劑量組能改善C-BSA型腎炎家兔腎臟的組織病理變化如腎小管擴(kuò)張，腎小管萎縮，腎小管上皮細(xì)胞變性壞死，腎小管管型，腎間質(zhì)淤血出血，腎間質(zhì)纖維化，腎間質(zhì)水腫，腎間質(zhì)炎癥等情況得到明顯改善(p<0.05)；MOSSON染色結(jié)果顯示家兔腎間質(zhì)纖維結(jié)締組織增生、各劑量組SPA染色結(jié)果顯

5、示腎小球基底膜明顯增厚，腎小球固塞、閉塞，腎小囊擴(kuò)張，腎小管擴(kuò)張和水腫等情況均得到明顯改善。
　　3.復(fù)方保腎顆粒1.2g/kg劑量組家兔腎臟組織ICAM-1、IL-6積分光密度（MID）顯著降低(P<0.05)。
　　4.復(fù)方保腎顆粒1.5g/kg、0.75g/kg劑量組動(dòng)物能降低大鼠阿霉素腎炎模型的尿蛋白含量，其中1.5g/kg在給藥后1、2、3周都有明顯的降低（p<0.05），0.75g/kg劑量組在給藥后兩周也出現(xiàn)了

6、明顯的降低；復(fù)方保腎顆粒1.5g/kg劑量組能明顯降低大鼠血肌酐含量（p<0.01）；復(fù)方保腎顆粒1.5g/kg、0.75g/kg劑量能顯著降低大鼠血尿素氮含量（p<0.01）。
　　5.阿霉素腎炎大鼠HE染色檢測(cè)：1.5g/kg劑量組2例（2/9）、0.75g/kg劑量組4例（4/10）、0.375g/kg劑量組2例（2/10）大部分腎小管細(xì)胞腫脹，空泡變性明顯，官腔內(nèi)可見(jiàn)明顯蛋白管型。各組其余腎臟組織腎被膜完整，1.5g/kg

7、劑量組腎小球系膜增生不明顯，0.375g/kg劑量組腎小球部分系膜細(xì)胞輕度增生；其余動(dòng)物腎小管細(xì)胞腫脹空泡變性、管腔內(nèi)蛋白管型及間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)程度1.5g/kg劑量<0.75g/kg劑量<0.375g/kg劑量；復(fù)方保腎顆粒1.5g/kg劑量組大鼠腎臟腎間質(zhì)纖維結(jié)締組織增生明顯改善，表現(xiàn)為MASSON染色平均光密度降低(p<0.05)；復(fù)方保腎顆粒各劑量組SPA染色結(jié)果顯示腎小球基底膜明顯增厚，腎小球固塞、閉塞，腎小囊擴(kuò)張，腎小管擴(kuò)張和

8、水腫等情況均得到明顯改善。
　　6.復(fù)方保腎顆粒1.5g/kg劑量組大鼠腎臟組織Nephrin積分光密度（MID）顯著提升(p<0.05)；復(fù)方保腎顆粒1.5g/kg、0.75 g/kg劑量組大鼠腎臟組織TGF-β1含量降低（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　家兔C-BSA型免疫復(fù)合型腎炎模型和大鼠阿霉素腎炎模型可以作為人類慢性腎小球腎炎的動(dòng)物疾病模型，復(fù)方保腎顆粒對(duì)以上二種模型的尿蛋白、血肌酐、尿素氮含量及腎臟病理改