早期妊娠絨毛組織PAPP-A表達(dá)及血清PAPP-A水平與早妊結(jié)局的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　通過測定孕5-12周早孕婦女的血清PAPP-A水平及正常妊娠與自然流產(chǎn)絨毛組織中PAPP-A的表達(dá)，以明確妊娠相關(guān)血漿蛋白-A(pregnancy associated plasma protein-A，PAPP—A)與早期妊娠結(jié)局的相關(guān)性，為臨床上先兆流產(chǎn)的保胎治療提供依據(jù)。
　　方法：
　　1.病例資料
　　1.1ELISA分析血清PAPP-A
　　選取2013年2月至2014年6月期間就診

2、我院遺傳與優(yōu)生門診的孕5-12周早孕婦女79例，年齡l8-45歲，平均27歲，月經(jīng)規(guī)律者以末次月經(jīng)時間計算孕周，少數(shù)月經(jīng)不規(guī)則的，經(jīng)B超檢查輔助確定孕周。其中27例患者出現(xiàn)先兆流產(chǎn)的癥狀，52例無先兆流產(chǎn)。隨訪至妊娠12周，以觀察早期妊娠的結(jié)局。
　　排除標(biāo)準(zhǔn):患者孕期服藥史、原發(fā)性高血壓疾病、糖尿病、甲狀腺功能亢進(jìn)、有毒有害物質(zhì)接觸史、孕婦夫妻雙方染色體異常、子宮畸形、內(nèi)分泌異常以及免疫功能異常和感染等。
　　1.2免疫組

3、化法分析絨毛組織中PAPP-A分布及表達(dá)
　　自然流產(chǎn)組（流產(chǎn)組）：收取自然流產(chǎn)或胚胎停育（包括13例ELISA組流產(chǎn)的患者）孕婦流產(chǎn)清宮時絨毛組織33例作為流產(chǎn)組，-70℃保存?zhèn)溆谩；颊吣挲g22-35歲，平均年齡26歲。
　　正常妊娠組（對照組）：選擇30例健康孕婦在我院同期自愿流產(chǎn)術(shù)的流產(chǎn)絨毛組織，作為對照組，-70℃保存?zhèn)溆?。年齡23-32歲，平均26歲，以前有正常生育史，本次無陰道出血、下腹疼痛等癥狀。
　　2

4、.實驗方法
　　2.1酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）：
　　收集79例早孕婦女5ml空腹靜脈血，離心，吸取上層血清，-70℃保存?zhèn)溆?。選擇酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清PAPP-A含量，進(jìn)行PAPP-A水平測定。
　　2.2免疫組化法：
　　使用免疫組化法，分別測定流產(chǎn)組及對照組患者流產(chǎn)絨毛組織中PAPP?A的表達(dá)。
　　3.統(tǒng)計學(xué)分析
　　所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計用軟件處理。對79例早妊婦女血清中PAPP

5、-A水平分析，采用t、χ2檢驗，并對流產(chǎn)組和對照組絨毛組織PAPP-A表達(dá)分析，采用t檢驗。以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)，P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.血清中PAPP-A水平：
　?、傺錚APP-A水平在早孕婦女中隨著孕周的增大而升高。見表2-1、圖2-1。
　　②隨訪至妊娠12周，觀察早期妊娠結(jié)局，在研究中的79例早孕婦女中,其中13例(16.46％)為異常妊娠(即自然流產(chǎn)、胚胎停止發(fā)育), B

6、超見胎心且超聲胎齡為12周者66例(83.54%)。見表2-3。
　?、?9例早孕婦女中，根據(jù)有無臨床流產(chǎn)癥狀，分為有先兆流產(chǎn)癥狀的27例，無先兆流產(chǎn)癥狀的52例。有先兆流產(chǎn)癥狀的27例早孕婦女中，5例患者PAPP-A血值低于PAPP-A MoM值（有3例最終發(fā)生流產(chǎn)，2例繼續(xù)妊娠），22例PAPP-A血值正常者（其中5例最終發(fā)生流產(chǎn)，17例繼續(xù)妊娠）；無先兆流產(chǎn)癥狀患者52例，4例患者PAPP-A血值低于PAPP-A MoM值（

7、其中2例最終發(fā)生流產(chǎn)，2例繼續(xù)妊娠），48例PAPP-A血值正常者（其中3例最終發(fā)生流產(chǎn)，45例繼續(xù)妊娠）。見表2-2。
　　2.絨毛組織形態(tài)學(xué)比較流產(chǎn)組與正常組絨毛組織HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察：流產(chǎn)絨毛外合體滋養(yǎng)細(xì)胞明顯減少，成大片狀融合，內(nèi)層細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞增生、在細(xì)胞數(shù)量上有所增加；間質(zhì)細(xì)胞發(fā)生纖維素樣變性；嗜酸性增強(qiáng)（圖2）。對照組絨毛外合體滋養(yǎng)細(xì)胞體積較大，胞漿豐富，且相互融合，內(nèi)層的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞核呈空泡狀，細(xì)胞輪廓清晰；

8、絨毛內(nèi)間充質(zhì)細(xì)胞呈星芒狀排列（圖1）。
　　3.流產(chǎn)組與正常組絨毛組織中PAPP-A的分布與表達(dá)流產(chǎn)組與對照組絨毛組織中均可見到PAPP-A表達(dá)的陽性棕黃色顆粒。PAPPA表達(dá)于絨毛外層滋養(yǎng)細(xì)胞的胞質(zhì)中（見圖3、4）。兩組之間PAPP?A表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其中流產(chǎn)組絨毛組織中PAPPA陽性細(xì)胞表達(dá)以1+為主，對照組主要以0+、1+為主，且流產(chǎn)組PAPP?A平均灰度值較對照組高。
　　結(jié)論：
　　1.