2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  新近研究發(fā)現(xiàn)PAPP-A是冠狀動脈粥樣斑塊不穩(wěn)定性的炎性生物標志物之一,血清PAPP-A的升高變化對急性冠脈綜合征的早期診斷及預后具有一定價值。與孕婦血清PAPP-A不同,非孕血清中的PAPP-A以低水平存在,而目前使用的PAPP-A檢測方法靈敏度較低,不適用非孕血清的檢測。本研究采用活性氧傳遞免疫分析技術(shù)方法,建立適合檢測ACS患者血清超敏PAPP-A水平的定量分析體系,評價分析方法的各項性能指標。在此基礎(chǔ)上對ACS

2、患者標本分組檢測,實驗研究在急性冠狀動脈綜合征患者血清中,PAPP-A是否對ACS具有較好的預測作用,對此類疾病危險分層和預后評估的價值。
  方法:
  制備生物素化PAPP-A抗體和抗體包被的受體微球,以雙抗體夾心法與血清中PAPP-A結(jié)合,以光激化學發(fā)光分析方法檢測PAPP-A濃度。通過改變加樣模式、加樣順序,調(diào)整試劑比例和反應時間溫度等方面,優(yōu)化檢測方法的反應條件。利用ELISA Cale軟件建立四參數(shù)擬合方程的標準

3、曲線,初步建立PAPP-A均相化學發(fā)光免疫檢測方法。同時評價均相化學發(fā)光分析檢測PAPP-A方法的靈敏度、精密度、準確性、穩(wěn)定性等各項性能指標,初步推算正常人的參考范圍。根據(jù)病程進展對急性冠脈綜合征患者進行分組研究,比較各組 ACS患者與對照組的PAPP-A水平有何差別,同時與其它ACS相關(guān)的指標進行分析,初步探討PAPP-A與ACS之間的臨床相關(guān)性。
  結(jié)果:
  確定PAPP-A檢測方法:在96孔板中加入25ul生物素

4、化抗體(1:2000),25ul受體球(1:100),25ul樣本,于37℃孵育30min,避光條件下加入175ul供體微球,于37℃孵育10min測定信號值。此PAPP-A檢測方法靈敏度為0.55mU/L,回收率在95%-100%;線性、穩(wěn)定性及特異性良好;重復性:批內(nèi)變異系數(shù)(CV)小于10%,批間CV小于15%;選擇血紅蛋白、甘油三酯和膽紅素三種常見干擾因素對此檢測方法的干擾較小。采用時間分辨熒光免疫分析(TRFIA)與本實驗建立

5、的均相化學發(fā)光法檢測30例(10例心梗患者,20例孕婦)血清標本,二者進行相關(guān)分析(r2=0.988,P<0.05)。檢測104例健康體檢者(男/女:43/61,年齡:24-69歲)血清PAPP-A水平,初步推算參考范圍為1.60—25.12mU/L。
  結(jié)論:
  本實驗建立了一種適用于ACS患者以均相化學發(fā)光免疫分析技術(shù)檢測血清低妊娠相關(guān)血漿蛋白A水平的方法。我們所建立的超敏PAPP-A檢測方法準確性好,靈敏度、回收率

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