虎眼萬年青對人非小細(xì)胞肺癌H1299細(xì)胞增殖與凋亡的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：虎眼萬年青是一種天然中草藥植物，其多種化學(xué)成分已被證實(shí)具有強(qiáng)效抗癌活性，探討虎眼萬年青鱗莖及葉醇提物對人非小細(xì)胞肺癌H1299細(xì)胞增殖抑制、凋亡作用及機(jī)制。
　　方法：應(yīng)用MTT法測定不同濃度、不同時間段虎眼萬年青鱗莖及葉醇提物對人肺腺癌H1299細(xì)胞株的增殖抑制作用;倒置顯微鏡觀察肺癌H1299細(xì)胞形態(tài)變化，熒光顯微鏡觀察H1299細(xì)胞凋亡變化;流式細(xì)胞術(shù)觀察虎眼萬年青醇提物對H1299細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用;Western

2、Blot檢測經(jīng)虎眼萬年青醇提物處理后H1299細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白（Bcl-2、Bax、Bad蛋白）的表達(dá)情況;實(shí)時熒光定量法(RT-PCR)檢測經(jīng)虎眼萬年青醇提物處理后H1299細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2、Bax、Bad)的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：MTT結(jié)果顯示，虎眼萬年青鱗莖及葉醇提物作用于人肺腺癌H1299細(xì)胞后，48h及72h濃度為0.5、1、2、5、10mg/mL時細(xì)胞活性與空白對照組相比明顯降低，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜

3、0.05、P＜0.01）;溶媒組(DMSO＜0.1％)與空白對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。倒置顯微鏡顯示加藥組細(xì)胞生長明顯受抑制，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變;熒光顯微鏡及流式細(xì)胞術(shù)顯示，虎眼萬年青鱗莖及葉醇提物正丁醇相可促進(jìn)H1299細(xì)胞凋亡;Western Blot結(jié)果顯示經(jīng)虎眼萬年青醇提物處理后H1299細(xì)胞中Bcl-2蛋白表達(dá)下降、Bax蛋白無明顯變化、Bad蛋白表達(dá)升高，Bax/Bcl-2比值升高;實(shí)時熒光定量法(RT-P