OSAS模型大鼠海馬區(qū)DDHD2和ERC2表達及突觸變化的實驗研究.pdf

1、目的：
　　監(jiān)測阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(Obstructive sleep apnea syndrome，OSAS)模型大鼠空間學習記憶能力變化。檢測實驗大鼠海馬區(qū)DDHD2及ERC2蛋白的表達變化，并觀察突觸前活動區(qū)超微結(jié)構(gòu)變化。
　　方法：
　　22只雄性SD大鼠隨機分為正常對照組與OSAS模型組，每組11只。通過設(shè)置慢性間歇性缺氧（Chronic intermittent hypoxia，CIH）環(huán)境，模擬OS

2、AS過程，建立大鼠實驗模型。用Morris水迷宮（Morris water maze,MWM）觀察實驗大鼠空間學習與記憶能力變化；使用蛋白質(zhì)印跡法（Western Blot，WB）觀察實驗大鼠海馬區(qū)DDHD2及ERC2蛋白的表達變化；并通過免疫組織化學（immunohistochemistry，IHC）法觀察DDHD2及ERC2在海馬CA1區(qū)神經(jīng)細胞的表達定位。最后在透射電鏡下，觀察突觸前活動區(qū)超微結(jié)構(gòu)的變化。
　　結(jié)果：

3、　　OSAS模型建立評估：與常氧環(huán)境比較，低氧環(huán)境中的OSAS實驗大鼠出現(xiàn)了活動減少、睡眠增多、呼吸頻率加快及抬頭呼吸等缺氧表現(xiàn)。同時監(jiān)測低氧環(huán)境中大鼠尾動脈血氧飽和度（SpO2）波動在69％至82%之間，常氧環(huán)境中SpO2波動在96%至100%之間。MWM結(jié)果：定位航行試驗中兩組實驗大鼠的逃避潛伏期隨著每天重復訓練的增加而不斷縮短。正常對照組為（第1天39.4±11.0，第2天32.4±7.9，第3天17.4±5.9，第4天11.4±

4、4.8，第5天8.0±3.1）；OSAS模型組為（第1天46.8±12.4，第2天43.6±10.7，第3天32.3±9.5，第4天26.6±8.1，第5天22.1±7.1）。不同天數(shù)模型組逃避潛伏期均較正常組延長，兩組差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）?？臻g探索試驗：實驗大鼠穿越原目標平臺的次數(shù)為（正常對照組5.3±2.1，OSAS模型組3.1±1.7），結(jié)果表明模型組大鼠穿越原目標平臺的次數(shù)較正常組減少，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.

5、05）；在目標象限的時間百分比為（正常對照組31.5±5.6，OSAS模型組24.2±7.1），結(jié)果顯示模型組大鼠在目標象限的時間百分比較正常組降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Western Blot結(jié)果：OSAS模型大鼠海馬區(qū)DDHD2蛋白表達的灰度值較正常組增高（正常組1.03±0.39，OSAS模型組1.47±0.37）；模型組ERC2蛋白表達的灰度值較正常組降低（正常組0.50±0.20，OSAS模型組0.29±0.1

6、4），差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。免疫組化法觀察到DDHD2在兩組實驗大鼠海馬CA1區(qū)的神經(jīng)細胞胞漿及胞核內(nèi)表達，ERC2在實驗大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細胞胞漿內(nèi)表達。透射電鏡結(jié)果：模型組大鼠海馬CA1區(qū)突觸前活動區(qū)長度減少（正常組0.30±0.05，OSAS模型組0.21±0.06），與正常組比較有顯著差異（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　CIH模擬OSAS所建立的實驗動物模型，出現(xiàn)了學習、記憶能力等認知功能障礙及