抑郁模型大鼠海馬區(qū)p-CREB1表達(dá)水平及神經(jīng)元突觸超微結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、背景
　　 研究發(fā)現(xiàn)，海馬區(qū)磷酸化環(huán)磷腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1(phospho cAMP responseelement-binding protein1，p-CREB1)表達(dá)減少、神經(jīng)元活性改變、突觸可塑性改變與抑郁癥相關(guān)。p-CREB1、神經(jīng)發(fā)生、突觸可塑性與抑郁癥之間的具體發(fā)病機(jī)制仍未完全闡明。本課題擬通過(guò)研究抑郁模型大鼠海馬區(qū)p-CREB1的表達(dá)和神經(jīng)元、突觸超微結(jié)構(gòu)變化，及藥物干預(yù)對(duì)其影響來(lái)探討抑郁癥可能的發(fā)病機(jī)制。

2、r>　　 目的
　　 1.探討抑郁模型大鼠海馬區(qū)p-CREB1表達(dá)水平及藥物干預(yù)對(duì)其影響。
　　 2.探討抑郁模型大鼠海馬神經(jīng)元、突觸超微結(jié)構(gòu)變化及藥物干預(yù)后的改變。
　　 3.探討抑郁模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力變化及藥物干預(yù)對(duì)其影響。
　　 方法
　　 1.大鼠先分為正常組(n=12)和造模組(n=42)。造模組建立慢性不可預(yù)見(jiàn)溫和應(yīng)激(chronic unpredictable mild stre

3、ss，CUMS)抑郁模型，再分為三組：抑郁模型對(duì)照組(n=14，不進(jìn)行灌胃操作)、抑郁模型+生理鹽水組(n=14，每日灌胃注入生理鹽水)和抑郁模型+藥物干預(yù)組(n=14，每日灌胃注入文拉法辛)。
　　 2.通過(guò)測(cè)量體重、蔗糖水消耗試驗(yàn)、曠場(chǎng)試驗(yàn)檢測(cè)動(dòng)物的行為學(xué)表現(xiàn)，通過(guò)Morris水迷宮檢測(cè)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力。
　　 3.采用免疫組化方法檢測(cè)四組大鼠海馬區(qū)p-CREB1蛋白表達(dá)水平；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)

4、檢測(cè)CREB1mRNA表達(dá)水平。
　　 4.采用透射電子顯微鏡觀察大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元和突觸超微結(jié)構(gòu)。
　　 結(jié)果
　　 1.造模結(jié)果：大鼠造模前、造模后在體重(t=2.172，P<0.05)、蔗糖水消耗(t=3.306，P<0.01)、曠場(chǎng)試驗(yàn)中央停留時(shí)間(t=-3.568，P<0.01)、水平運(yùn)動(dòng)距離(t=2.330，P<0.05)、豎立次數(shù)(t=2.147，P<0.05)等項(xiàng)目差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證明抑郁模型建立

5、成功。藥物干預(yù)結(jié)束后，四組大鼠行為學(xué)評(píng)分比較：體重(F=40.009，P<0.01)，蔗糖水消耗(F=17.851，P<0.01)，曠場(chǎng)試驗(yàn)中央停留時(shí)間(F=35.319，P<0.01)，水平運(yùn)動(dòng)距離(F=7.509，P<0.01)，豎立次數(shù)(F=11.970，P<0.01)。Morris水迷宮試驗(yàn)：定位航行實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期比較(F第一天=1.817，P>0.05；F第七天=30.559，P<0.01)，空間探索實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)比較(F游動(dòng)總距離

6、=14.154，P<0.01；F穿過(guò)平臺(tái)區(qū)次數(shù)=31.198，P<0.01；F時(shí)間比=34.185，P<0.01)；顯示抑郁模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降，藥物干預(yù)可改善學(xué)習(xí)記憶能力。
　　 2.免疫組化結(jié)果：四組大鼠海馬區(qū)p-CREB1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目(Fca1=16.497，P<0.01；Fca3=23.494，P<0.01；FDG=37.628，P<0.01)，陽(yáng)性細(xì)胞積分光密度(Fca1=26.659，P<0.01；Fca3=4.

7、466，P<0.01；FDG=6.158，P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，顯示p-CREB1表達(dá)水平不同。
　　 3.RT-PCR結(jié)果：四組大鼠海馬區(qū)CREB1mRNA表達(dá)情況比較(F=6.669，P<0.01)；其中抑郁模型大鼠表達(dá)水平低于正常組(P<0.05)，藥物組大鼠表達(dá)水平高于抑郁模型大鼠(P<0.01)。
　　 4.電鏡結(jié)果：抑郁模型大鼠海馬神經(jīng)元和突觸超微結(jié)構(gòu)存在病理性改變；藥物干預(yù)能使其改善。突觸形態(tài)學(xué)

8、各參數(shù)比較：四組大鼠海馬在突觸數(shù)目(F=3.983，P<0.05)、突觸活性區(qū)長(zhǎng)度(F=8.848，P<0.01)、突觸后致密物厚度(F=18.896，P<0.01)三個(gè)項(xiàng)目上差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論
　　 1.成功建立了CUMS抑郁模型，采用文拉法辛干預(yù)改善了抑郁模型大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)。
　　 2.抑郁模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降，藥物干預(yù)可使其改善。
　　 3.抑郁模型大鼠海馬區(qū)p-CREB1表達(dá)水