全腦缺血再灌注損傷后大鼠海馬區(qū)Skp2的表達(dá)研究.pdf

1、目的：觀察大鼠全腦缺血再灌注損傷后海馬區(qū)S 期激酶相關(guān)蛋白2（S phasekinase-associated protein 2，Skp2）蛋白及其下游底物p27 蛋白的表達(dá)變化，為進(jìn)一步探討其在缺血性腦損傷中的作用提供實驗依據(jù)。
　　 方法：雄性SD 大鼠90只隨機(jī)分為2組：對照組(n=30)，全腦缺血再灌注組(n=60)。
　　 采用Pulsinelli 四血管結(jié)扎法建立大鼠全腦缺血再灌注損傷模型,全腦缺血30mi

2、n后進(jìn)行再灌注；對照組為假手術(shù)組，只分離血管，不進(jìn)行缺血再灌注處理。分別于大鼠全腦缺血再灌注4d，7d 用免疫組織化學(xué)法檢測海馬區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元變化；提取海馬組織總RNA，采用實時熒光定量PCR檢測海馬區(qū)細(xì)胞周期蛋白cyclinB1 mRNA的表達(dá)變化；用western blot 方法檢測海馬區(qū)Skp2 及底物細(xì)胞周期依賴性激酶抑制劑p27 蛋白的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：與對照組相比，大鼠全腦缺血再灌注4d，7d后，星形膠

3、質(zhì)細(xì)胞明顯活化、增殖；海馬CA1 區(qū)神經(jīng)元在再灌注7d 時明顯減少。實時熒光定量PCR結(jié)果顯示，與對照組相比，在全腦缺血再灌注4d和7d 海馬區(qū)cyclinB1 mRNA表達(dá)明顯增高(P<0.05)。Western blot 結(jié)果顯示，與對照組相比，在全腦缺血再灌注4d和7d 海馬區(qū)Skp2表達(dá)逐漸增高,而p27 蛋白的表達(dá)逐漸降低(P<0.05)。
　　 結(jié)論：全腦缺血再灌注損傷大鼠海馬區(qū)Skp2的表達(dá)升高,其底物p27表達(dá)降