基于UPLC-HDMS代謝組學(xué)技術(shù)研究馬兜鈴酸腎毒性及其毒理機制.pdf

1、馬兜鈴酸腎病（AAN）是一種服用含有馬兜鈴酸(AA)中藥導(dǎo)致的腎臟疾病，目前AAN機理尚不明確，制約著臨床上含AA中藥的使用。代謝組學(xué)是主要研究生物整體內(nèi)源性代謝物質(zhì)變化的學(xué)科，代謝組學(xué)廣泛用于疾病診斷和藥物毒性研究。
　　目的:
　　基于超高效液相色譜-高清質(zhì)譜(UPLC-HDMS)代謝組學(xué)方法，并結(jié)合藥理學(xué)的方法，對AAN不同階段導(dǎo)致內(nèi)源性代謝產(chǎn)物的變化進行系統(tǒng)研究，并闡明病理機制，為含馬兜鈴酸的中藥合理應(yīng)用提供參考依據(jù)

2、。
　　方法:
　　選取體重為200±10g的雄性SD大鼠60只，隨機分為AAN模型組和正常對照組，每組30只。模型組大鼠按體重每天灌胃20mg/kg的AA溶液(含0.5％NaHCO3)，對照組大鼠按體重灌胃同等劑量的0.5％NaHCO3溶液，連續(xù)灌胃12周，停止給AA后再觀察12周，建立AAN大鼠模型。給AA分別在第4、8、12和24周收集尿液、血清和腎組織樣品，用于尿液和血清生化指標、組織病理學(xué)分析以及尿液、血清和腎組織

3、的代謝組學(xué)研究。
　　結(jié)果:
　　1.AAN大鼠的尿液代謝組學(xué)研究結(jié)果:在第4周、第8周和第12周分別鑒定出16、14和15個生物標示物。生物化學(xué)途徑分析發(fā)現(xiàn)AA導(dǎo)致的腎損傷與檸檬酸循環(huán)、腸道微生物代謝、氨基酸代謝、嘌呤代謝和膽汁酸合成等擾亂有關(guān)。
　　2.AAN大鼠血清代謝組學(xué)研究結(jié)果:?；蛆Z去氧膽酸、12-酮脫氧膽酸、溶血卵磷脂(15∶0)和二十二碳六烯酸4個代謝產(chǎn)物為早期AAN的血清生物標示物;溶血卵磷脂(22∶

4、5)、硫酸吲哚酚、尿酸和肌酐為晚期AAN大鼠血清生物標示物;模型組大鼠血清中溶血磷脂酰乙醇胺(20∶2)、膽酸、鵝去氧膽酸、胱硫醚亞砜和溶血卵磷脂(17∶0)的含量在各時間點都發(fā)生顯著改變。生化途徑分析發(fā)現(xiàn)這些代謝產(chǎn)物主要與脂質(zhì)、氨基酸和嘌呤的代謝有關(guān)。
　　3.AAN大鼠腎組織代謝組學(xué)研究結(jié)果:甘油三酯、磷脂酰膽堿和溶血卵磷脂等脂質(zhì)可作為AAN的能區(qū)分模型組與正常組的重要代謝產(chǎn)物，AAN不同階段的發(fā)病機理主要與脂肪酸、膽汁酸、甘