個(gè)體化HLA-A2限制性腫瘤抗原肽的篩選方法建立及其在結(jié)腸癌抗原肽中的研究.pdf

1、近幾年免疫檢查點(diǎn)抗體治療取得了巨大成功，但仍有超過(guò)50％的腫瘤患者未能對(duì)阻斷治療作出反應(yīng)。同時(shí)，精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)依靠驗(yàn)證過(guò)的生物標(biāo)志物來(lái)更好地預(yù)測(cè)及劃分患者可能的疾病風(fēng)險(xiǎn)，從而預(yù)先對(duì)治療做出反應(yīng)，這使尋找可靠的腫瘤抗原肽變得尤為重要。新技術(shù)（如第二代測(cè)序）的出現(xiàn)為腫瘤免疫學(xué)尋找新的免疫靶標(biāo)提供了新的手段，使免疫治療廣泛地應(yīng)用到腫瘤患者。在本論文中，將重點(diǎn)討論腫瘤免疫治療中腫瘤抗原肽的鑒定。惡性腫瘤自身抗原的表達(dá)可以激發(fā)腫瘤的免疫反應(yīng)，腫瘤抗原肽

2、特異性的免疫治療可以推動(dòng)腫瘤的消失。但是，目前鑒定出的腫瘤抗原肽特異性免疫治療效果并不理想，尚需獲得更有效的自身腫瘤抗原進(jìn)行臨床試驗(yàn)，使利用腫瘤疫苗或免疫療法治愈腫瘤成為可能。
　　本研究使用一種聯(lián)合色譜、質(zhì)譜及生物信息學(xué)預(yù)測(cè)分析的生化方法，以結(jié)腸癌腫瘤組織為研究對(duì)象，從免疫親和純化過(guò)的人類白細(xì)胞抗原-A2(Human leukocyteantigen-A2，HLA-A2)分子中獲得12條結(jié)腸癌抗原肽即為CC1至CC12。由于無(wú)法

3、大量獲得天然的抗原肽，進(jìn)而采取化學(xué)合成的方法，并測(cè)試它們是否可用于穩(wěn)定細(xì)胞表面產(chǎn)生的主要組織相容性復(fù)合體（Major histocompatibility complex，MHC）分子，并分析其引起細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（Cytotoxic lymphocyte，CTL）免疫反應(yīng)的能力。結(jié)果表明，該篩選抗原肽的方法有效。在混合肽檢測(cè)結(jié)果中，混合肽(CC1、CC2、CC3、CC4)相對(duì)于空白對(duì)照組有顯著性差異，可以認(rèn)為CC1-4中至少有一個(gè)多

4、肽是此腫瘤病人的結(jié)腸癌抗原肽。在單個(gè)肽檢測(cè)結(jié)果中，CC1、CC9、CC10、CC11、CC12產(chǎn)生的γ-干擾素（Interferon-γ，IFN-γ）量皆有一定幅度的增加，CC2、CC5、CC6、CC7、CC8產(chǎn)生的IFN-γ量并無(wú)明顯差異。基于混合肽中，僅有CC1-4有明顯殺傷結(jié)果，推測(cè)此方法篩選出的結(jié)腸癌抗原肽CC1為此患者的結(jié)腸癌抗原肽，其余的CC9、CC10、CC11、CC12可能殺傷效果并不突出或者此檢測(cè)方法并沒(méi)有反映出他們的