芪藶強(qiáng)心減輕雌激素缺失小鼠心肌梗死后心室重構(gòu)的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:急性心肌梗死（心梗）因其高發(fā)病率及高致殘率，已成為當(dāng)今世界面臨的重大疾病之一。絕經(jīng)期后婦女因缺乏雌激素的保護(hù)，心梗的發(fā)病率較絕經(jīng)期前顯著上升且預(yù)后較絕經(jīng)期前婦女或同齡男性更差。本課題組前期的多中心隨機(jī)對照雙盲研究證實(shí)芪藶強(qiáng)心膠囊對臨床心衰病人的治療效果確切。本課題以雙側(cè)卵巢切除小鼠模擬臨床絕經(jīng)期后的婦女，旨在探究中藥芪藶強(qiáng)心對雌激素缺失小鼠心梗后心室重構(gòu)和慢性心力衰竭的保護(hù)作用及其分子機(jī)制。
　　方法:本課題實(shí)驗(yàn)對象為8周齡

2、大C57BL/6雌性小鼠，首先進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除手術(shù)，卵巢切除術(shù)后7天，采用結(jié)扎冠狀動脈前降支的方法建立心梗模型，心梗后第一天起口飼芪藶強(qiáng)心溶液0.5g/kg/d，連續(xù)治療21天。21天后到達(dá)實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)，用小動物心臟超聲成像系統(tǒng)檢測各組小鼠心功能，用馬松染色評估心肌纖維化，并通過實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)檢測CollagenⅠ，CollagenⅢ和α-SMA來評估心臟膠原沉積，用凋亡

3、染色評估心肌凋亡，用蛋白免疫印跡檢測相關(guān)信號通路;在明確芪藶強(qiáng)心上調(diào)過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferator activated receptorγ，PPARγ）后，通過在口飼芪藶強(qiáng)心的同時(shí)腹腔注射PPARγ激動劑羅格列酮或PPARγ抑制劑T0070907的方法，驗(yàn)證過表達(dá)或抑制PPARγ是否使芪藶強(qiáng)心對雌激素缺失小鼠心梗后的治療作用進(jìn)一步增強(qiáng)或減弱，從而明確PPARγ是否為芪藶強(qiáng)心減輕雌激素缺失小鼠

4、心梗后心室重構(gòu)和慢性心力衰竭所必須;最后用PCR檢測了心臟能量代謝相關(guān)的基因表達(dá)水平，觀察卵巢切除，心梗及芪藶強(qiáng)心治療對心肌能量代謝的影響。
　　結(jié)果:結(jié)果表明雌激素缺失小鼠心梗后21天心臟射血分?jǐn)?shù)(ejection fraction，EF)及短軸縮短率（shortening fraction，F(xiàn)S）較假手術(shù)組明顯下降，心肌纖維化及心肌凋亡明顯增加，PPARγ表達(dá)下降;芪藶強(qiáng)心治療組較安慰劑治療組相比，芪藶強(qiáng)心可提高心功能（EF及

5、FS），減輕心肌纖維化及心肌凋亡，并上調(diào)PPARγ水平;用T0070907抑制PPARγ后，芪藶強(qiáng)心保護(hù)雌激素缺失小鼠心梗后心功能及心室重構(gòu)的作用被抑制，而羅格列酮并不能進(jìn)一步增強(qiáng)芪藶強(qiáng)心的心臟保護(hù)功能;之后的實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明芪藶強(qiáng)心可促進(jìn)心梗小鼠慢性重構(gòu)期的能量代謝相關(guān)基因（Cd36，F(xiàn)atp，Pdk4，Acadm，Acadl，Acadvl，Cpt1a，Cpt1b和Cpt2）表達(dá)上調(diào)。
　　結(jié)論:芪藶強(qiáng)心可通過上調(diào)PPARγ減輕雌