慢性腎臟病4期患者證候及證候演變的脂質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　脂質(zhì)異常是慢性腎臟病(Chronic Kidney Disease，CKD)進展的危險因素。利用中醫(yī)“既病防變”的思想，對CKD4期不同證候及證候演變過程中的脂質(zhì)代謝物分析，以探索證候演變過程中出現(xiàn)的特異性脂質(zhì)，分析其影響腎小球濾過率下降的原因，并為中醫(yī)分型辨證以及證候演變提供客觀的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　本研究所有CKD4期數(shù)據(jù)和標本來源于廣東省中醫(yī)院承辦的國家中醫(yī)藥行業(yè)科技專項《CKD4期中醫(yī)優(yōu)化診

2、療方案的多中心、隨機對照臨床試驗》（HERBAAL研究）所建立的CKD4期臨床數(shù)據(jù)庫和生物標本庫;健康的社區(qū)人群標本來自2014年廣州市芳村區(qū)瀝窖社區(qū)調(diào)查建立的生物標本庫。在CKD4期患者數(shù)據(jù)庫中共存在兩種辨證類型:脾腎氣虛、濕濁瘀阻證（A證）和脾腎氣虛、濕濁瘀阻證兼濕熱證（B證），按照數(shù)據(jù)庫資料顯示所有患者的辨證信息，共存在兩種辨證分型，即由脾腎氣虛、濕濁瘀阻證（A證）和脾腎氣虛、濕濁瘀阻證兼濕熱證（B證）;故證候演變僅存在兩種類型:

3、A→B型和B→A型。根據(jù)數(shù)據(jù)庫信息，選取證候演變發(fā)生的最小時段（3個月），根據(jù)納入本研究的病例對應(yīng)的編號在數(shù)據(jù)庫中調(diào)取年齡、性別、及用藥情況，并且調(diào)取證候演變前（T1時間點）后（T2時間點）的血脂、腎小球濾過率（eGFR值）數(shù)據(jù);以分析證候演變前后eGFR值和血脂的變化，且通過患者用藥信息分析中西藥用藥分布是否存在差異，以排除用藥因素。
　　從第一部分結(jié)果看出A→B型證候演變時即伴隨濕熱兼證出現(xiàn)時eGFR是下降的，但是臨床血脂并未

4、發(fā)生明顯異常，故第二部分選取A→B型中eGFR變化較大的病例26例，調(diào)取其在證候演變前后T1、T2時間點所對應(yīng)的共52個血清標本，以及健康對照血清標本26個，采用高效液相色譜-質(zhì)譜法(High Performance LiquidChromatography，HPLC-MS)，分析A→B證演變過程的脂質(zhì)標志物，從而探索在濕熱兼證出現(xiàn)時的潛在脂質(zhì)標志物，并結(jié)合其代謝途徑分析此脂質(zhì)標志物影響CKD進展的潛在機制。
　　結(jié)果:
　

5、　1.兩種證候演變類型中僅A→B型前后的eGFR值比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.兩種證候演變類型的研究對象的中西藥用藥構(gòu)成比無差異(P＞0.05)，且同一證候演變類型下eGFR上升和下降的患者其中西藥用藥構(gòu)成比亦無差異（P＞0.05）。
　　3.納入的CKD4期研究對象的血脂在證候演變前后均未異常升高。
　　4.CKD4期患者有44種脂質(zhì)標志物，其中有29種脂質(zhì)標志物較健康人群血清含量升高:1種膽固

6、醇酯CE(14∶1);9種鞘脂Cer(38∶0;3)、Cer(38∶1;3)、Cer(40∶1;3)、Cer(40∶2;3)、CerCil(32∶1;2)、CerCil(32∶2;2)、CerCil(34∶2;2)、CerCil(42∶1;2)及SM(42∶2;2);5種磷脂中1種磷脂酸PA(22∶1+NH4)和4種卵磷脂PC(34∶3)、PC(36∶3)、PC(38∶4)、PC(40∶4);7種溶血性磷脂中3種溶血性磷脂酸LPA(20

7、∶1+NH4)、LPA(22∶1+NH4)、LPA(22∶2+NH4)，3種溶血性卵磷脂LPC(16∶0)、LPC(16∶1)、LPC(20∶3)和1種溶血性腦磷脂LPE(22∶4);7種甘油二酯DAG(34∶1+NH4)、DAG(34∶2+NH4)、DAG(36∶1+NH4)、DAG(36∶2+NH4)、DAG(36∶3+NH4)、DAG(36∶4+NH4)、DAG(32∶0+NH4)。15種脂質(zhì)標志物較健康人群血清含量降低:3種膽固

8、醇酯CE(18∶1)、CE(18∶2)、CE(20∶4);3種鞘脂Hex2Cer(28∶0;2)、HexCer(34∶0;3)、HexCer(40∶2;3);5種磷脂中2種卵磷脂PC(32∶1)、PC(36∶5)，1種磷脂酰磷脂酸PA(36∶2+NH4)，2種腦磷脂PE(32∶6)、PE(40∶6);2種甘油二酯DAG(40∶9+NH4)、DAG(46∶4+NH4);2種溶血性磷脂LPC(20∶5)、LPC(18∶3)。
　　5.

9、脾腎氣虛、濕濁瘀阻型CKD4期患者所特有的脂質(zhì)標志物有12種，其中10種較健康人群血清含量升高(P＜0.05):5種溶血性磷脂中2種溶血性磷脂酸LPA(20∶1+NH4)、LPA(22∶1+NH4)，2種溶血性卵磷脂LPC(16∶1)、LPC(20∶3)，1種溶血性腦磷脂LPE(22∶4);4種卵磷脂PC(34∶3)、PC(36∶3)、PC(38∶4)、PC(40∶4);1種鞘脂SM(42∶2;2)。較健康人群血清含量降低(P＜0.05

10、)的僅有2種膽固醇酯CE(18∶1)、CE(18∶2)。并分析脂質(zhì)標志物中僅CE(20∶4+NH4)與eGFR值變化相關(guān)。
　　6.脾腎氣虛、濕濁瘀阻兼濕熱型CKD4期患者所特有的脂質(zhì)標志物有6種，其中5種較健康人群血清含量降低（P＜0.05）∶2種溶血性卵磷脂LPC(20∶5)、LPC(18∶3)，2種卵磷脂PC(32∶1)、PC(36∶5)和1種腦磷脂PE(40∶6);而僅1種DAG(32∶0+NH4)血清含量高于健康人群(P

11、＜0.05)。并分析脂質(zhì)標志物中LPC(18∶3)和CerCil(32∶1;2)與eGFR值變化相關(guān)。
　　7.A→B證演變的過程中特異性脂質(zhì)標志物有10種，僅有2種脂質(zhì)含量升高(P＜0.05)，即CE(18∶1+NH4)、CE(18∶2+NH4);有8種脂質(zhì)含量發(fā)生降低(P＜0.05)，其中3種鞘脂CerPE(44∶2;2)、SM(40∶2;3)、SM(42∶1;2)，1種卵磷脂PC(34∶3)，4種溶血性磷脂LPA(22∶1+

12、NH4)、LPC(16∶1)、LPC(20∶3)、LPE(22∶4)。
　　8.對照KEGG數(shù)據(jù)庫中代謝通路，發(fā)現(xiàn)主要涉及磷脂代謝、鞘脂代謝、脂肪消化和吸收代謝通路，其中存在于磷脂代謝途徑上有PC、PE、PA、DAG、Lyso，存在于鞘脂代謝途徑上有Cer，存在于脂肪消化和吸收代謝途徑上有Lyso、DAG、CE。
　　結(jié)論:
　　1.脾腎氣虛、濕濁瘀阻證到脾腎氣虛、濕濁瘀阻兼濕熱證的演變伴隨腎小球濾過率的下降，但是臨床