母鼠維生素D缺乏及干預對仔鼠肺發(fā)育及VEGF、SP-C表達影響的研究.pdf

1、目的：
　　通過建立Vit D缺乏及Vit D干預母鼠模型，觀察母鼠孕期、哺乳期Vit D缺乏及適量1,25二羥維生素D3[1,25-(OH)2D3]干預對其仔鼠肺發(fā)育及肺血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、肺組織表面活性蛋白C（SP-C）的變化，從而探討母鼠Vit D缺乏及適量干預對仔鼠肺發(fā)育的影響及可能機制。
　　方法：
　　選取健康成年雌性清潔級SD大鼠，完全隨機分為正常對照組（對照組）、Vit D缺乏組（缺乏組）、1

2、,25-(OH)2D3干預組（干預組），每組6只。對照組及干預組母鼠予以正常飼料、正常光照喂養(yǎng)，缺乏組母鼠予不含Vit D飼料、避光喂養(yǎng)，試喂2周后，用ELISA法測定三組母鼠血清25-(OH)D值，再與正常成年雄性 SD大鼠合籠交配。于受孕第7天開始，干預組母鼠隔天一次給予1,25-(OH)2D3(10ug/kg)灌胃，對照組及缺乏組母鼠予1ml生理鹽水代替灌胃，一直到分娩后第21天，再次測三組母鼠血清25-(OH)D值，并檢測各組仔

3、鼠生后第1天及第21天血清25-(OH)D值，再取生后第1、7、14、21天仔鼠肺組織，觀察以下指標：1.仔鼠體重及肺濕重；2.光鏡下觀察肺形態(tài)結構；3.q-PCR法檢測肺組織VEGF mRNA水平的表達；4.免疫組織化學方法分別檢測肺組織VEGF、SP-C蛋白表達。
　　結果：
　　1.造模結果：通過不同方式喂養(yǎng)母鼠，試喂2周后三組母鼠之間血清25-(OH)D值比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；分娩后第21天，缺乏組

4、母鼠血清25-(OH)D值明顯低于對照組及干預組母鼠，有顯著差異（P＜0.01），干預組母鼠血清25-(OH)D值高于對照組母鼠，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；新生第1天仔鼠三組之間血清25-(OH)D值比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；新生第21天，缺乏組仔鼠血清25-(OH)D值低于對照組及干預組仔鼠，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），干預組仔鼠血清25-(OH)D值略高于對照組仔鼠，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。<

5、br>　　2.三組仔鼠體重及肺濕重結果：隨著日齡的增加，缺乏組仔鼠體重、肺濕重均低于同日齡對照組仔鼠，增長速度緩慢，缺乏組第14、21天仔鼠體重較對照組仔鼠輕，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），第7、14、21天仔鼠肺濕重較對照組仔鼠輕，有顯著差異（P＜0.01）；干預組仔鼠體重、肺濕重均高于同日齡對照組仔鼠，增長速度稍快，其體重較對照組仔鼠比均有差異（P＜0.05，0.01），第14、21天仔鼠的肺濕重較對照組仔鼠比有差異（P＜0.0

6、5）。
　　3.三組仔鼠HE染色光鏡觀察結果：缺乏組仔鼠較同日齡對照組仔鼠比肺組織肺泡數(shù)少，肺泡腔小，形態(tài)較不規(guī)則，實性團狀結構區(qū)域增加，肺泡間隔較寬；干預組仔鼠較同日齡對照組仔鼠比肺組織肺泡數(shù)稍增加，肺泡腔大小均勻，實性團狀結構區(qū)域減少，肺泡間隔較薄。
　　4.q-PCR法檢測三組仔鼠肺組織VEGF mRNA表達結果：隨著日齡的增加，對照組及干預組仔鼠肺組織VEGF mRNA的表達量逐漸增多，缺乏組仔鼠生后第1天表達量高于

7、對照組及干預組仔鼠，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，0.01），生后第7天較前下降，表達量明顯低于對照組及干預組仔鼠，有顯著差異（P＜0.01），之后表達量逐漸增加，但增長幅度較對照組及干預組仔鼠緩慢，增長曲線與正常組及干預組仔鼠有交叉現(xiàn)象；干預組仔鼠增長幅度較對照組仔鼠稍快，表達量均高于對照組仔鼠，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，0.01）。
　　5.免疫組織化學方法檢測三組仔鼠肺組織VEGF蛋白表達結果：隨著日齡的增加，對照組

8、及干預組仔鼠肺組織 VEGF蛋白的表達量逐漸增多，缺乏組仔鼠生后第1天表達量較對照組及干預組仔鼠略高，生后第7天較前下降，低于對照組及干預組仔鼠，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，0.01），之后表達量逐漸增加，增長幅度較對照組及干預組仔鼠緩慢；干預組仔鼠增長幅度較對照組仔鼠稍快，表達量均高于對照組仔鼠，第14、21天仔鼠之間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　6.免疫組織化學方法檢測三組仔鼠肺組織SP-C表達結果：三組仔鼠隨著

9、日齡的增加，肺組織SP-C的表達量逐漸增加，第21天最高；缺乏組仔鼠肺組織SP-C表達量均低于同日齡對照組及干預組仔鼠，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，0.01）；干預組仔鼠肺組織SP-C表達量較同日齡對照組仔鼠高，第14、21天仔鼠之間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結論：
　　1.母鼠孕期、哺乳期Vit D缺乏會抑制其仔鼠生后的肺發(fā)育過程，若給予適量1,25-(OH)2D3干預，對仔鼠的肺發(fā)育過程有一定幫助。