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文檔簡介
1、第一章宮內缺氧對新生大鼠宮內肺發(fā)育及肺VEGF表達變化的影響
目的:
建立宮內缺氧模型,觀察不同宮內缺氧時間對新生大鼠宮內肺發(fā)育的影響及出生時肺組織VEGF的表達變化。
方法:
通過降低孕鼠氧濃度吸入至10±0.5%,每天持續(xù)缺氧8小時,建立宮內缺氧模型。實驗分為四組:空氣對照組(簡稱對照組),缺氧2天組,缺氧6天組和缺氧10天組。自然分娩后,新生大鼠稱重后處死,對其進行肺濕重、肺
2、濕重/體重的測定;HE染色光鏡下觀察肺組織病理改變并測定放射狀肺泡計數(RAC)、肺血管形態(tài);電鏡下觀察肺內細胞變化;免疫組化方法測定肺組織VEGF蛋白表達及realtime-PCR測定肺組織VEGF mRNA表達。
結果:
1.大鼠宮內缺氧模型建立各缺氧組新生鼠出生體重明顯低于對照組(p均<0.05),肺組織病理示:肺泡結構不規(guī)則,排列紊亂,肺泡間隔分布不均勻,肺泡腔見出血,提示大鼠宮內缺氧模型復制成功。<
3、br> 2.肺組織一般情況隨宮內缺氧天數的增加各缺氧組新生大鼠出生時肺濕重逐漸降低,與對照組相比,p均<0.05;肺濕重/體重在缺氧2天組明顯降低(p<0.05),隨宮內缺氧天數的延長反而增加。
3.肺組織HE染色隨著缺氧天數增加,肺泡結構不規(guī)則,排列紊亂,肺泡間隔分布不均勻,肺泡腔可見不同程度出血。
4.放射狀肺泡計數缺氧2天組即明顯降低(p<0.05),隨宮內缺氧天數的增加進一步降低(p均<0.05
4、)。
5.肺血管形態(tài)測定隨著宮內缺氧時間的延長肺小動脈管壁厚度、管壁厚度/肺小動脈外徑(WT%)增加,缺氧10天組增加明顯(p<0.05)。
6.肺組織電鏡下改變隨著宮內缺氧時間的延長,Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮細胞破壞加重,內皮細胞增生、肺間質增生更明顯。
7.肺組織VEGF蛋白表達隨著宮內缺氧時間的延長,肺VEGF蛋白表達逐漸增強。
8.肺組織VEGF mRNA表達隨著宮內缺氧時間的延長
5、,肺VEGFmRNA表達逐漸增加。
結論:
1.宮內缺氧致新生大鼠宮內肺發(fā)育受阻及肺組織損傷。
2.宮內缺氧新生大鼠出生時肺VEGF表達增多,宮內缺氧下,VEGF可能是參與宮內肺發(fā)育的重要調節(jié)因子。
第二章宮內缺氧對新生大鼠生后肺發(fā)育及肺VEGF表達變化的影響
目的:
建立宮內缺氧模型,觀察宮內缺氧對生后常壓常氧生存狀態(tài)下新生大鼠肺發(fā)育的影響,及宮內缺氧
6、生后不同生存時間新生大鼠肺組織VEGF的表達變化,為探討宮內缺氧患兒生后治療提供實驗依據。
方法:
建立宮內缺氧模型(同第一章)。實驗分組為:空氣對照組(簡稱對照組),缺氧6天組(簡稱缺氧組)。兩組新生大鼠出生后均置于常壓常氧下飼養(yǎng)。分別于出生時、生后7d、14d、21d行相關檢查(同第一章),并于21d行肺功能檢測。
結果:
1.新生大鼠體重缺氧組生后不同生存時間點體重均低于同日
7、齡對照組(p均<0.05)。
2.肺組織一般情況缺氧組新生大鼠生后不同生存時間點肺濕重均低于同日齡對照組(p均<0.05);肺濕重/體重降低幅度減慢。
3.肺組織HE染色缺氧組生后隨著日齡增長出血減少,仍可見肺間隔增寬,肺組織正常結構局灶性破壞,局部肺結構紊亂,終末氣腔明顯擴張,小肺泡數量減少。
4.放射狀肺泡計數缺氧組進行性肺泡化速度較對照組減慢(p均<0.05)。
5.肺血管形
8、態(tài)測定生后各時間點肺血管形態(tài)缺氧組與對照組無明顯差異。
6.肺組織電鏡下改變隨著日齡增長,缺氧組Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮細胞破壞、內皮細胞增生較出生時減少;內皮細胞水腫明顯,于14d達高峰;各時間點肺間質較同日齡對照組增生明顯。
7.肺組織VEGF蛋白表達隨著日齡增長,缺氧組與對照組肺組織VEGF蛋白表達均逐漸增加,缺氧組增長幅度減慢,增長曲線與對照組呈交叉現(xiàn)象。
8.肺組織VEGF mRNA表達隨著日
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