高親和力IgE受體FcεR1與非酒精性脂肪肝病關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[背景/目的]
　　非酒精性脂肪肝病(nonalcoholicfattyliverdisease，NAFLD)是常見以脂質(zhì)堆積、酶學(xué)指標(biāo)持續(xù)異常為特點(diǎn)的臨床病理表現(xiàn)，是慢性肝臟疾病中的一個(gè)常見原因，是世界上一個(gè)重大的問題。調(diào)查結(jié)果顯示，肥胖促進(jìn)NAFLD病情加重。免疫球蛋白E(IgE)是介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的一種免疫球蛋白，高親和力IgE受體(FcεR1)是IgE的受體之一。Yun-JungLee等人做了一項(xiàng)研究，檢測(cè)隨機(jī)抽取的50名

2、肥胖婦女的血漿IgE，體質(zhì)量和體重指數(shù)(BMI)，粗略估計(jì)脂肪的含量，對(duì)此數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)血漿IgE水平隨其他三項(xiàng)指標(biāo)的升高而降低。并且做了相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)高脂飲食(HFD)誘導(dǎo)的FcεR1-/-肥胖小鼠進(jìn)食量增加和能量代謝降低，導(dǎo)致體質(zhì)量增加。本研究旨在通過HFD誘導(dǎo)小鼠NAFLD模型，探討FcεR1在NAFLD發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　[方法]
　　1.NAFLD模型的建立及指標(biāo)檢測(cè):隨機(jī)選取野生型C57BL/6J和I

3、gE受體敲除FcεR1-/-小鼠各10只，分為野生型組(WT)和基因敲除組(FcεR1-/-)，均給予HFD喂養(yǎng)，在每周一定的時(shí)間稱取其體質(zhì)量。喂養(yǎng)12周后，小鼠禁食12h，稱取體質(zhì)量后處死取材。取全血，離心后取血漿，用生化檢測(cè)儀檢測(cè)血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)等指標(biāo)。馬上快速剪斷肝血管并取出肝臟，稱取重量后分別制成組織石蠟切片和冰凍切片，分別用于HE、masson和油紅O染色，剩

4、余部分置于-80℃擱置，用于檢測(cè)肝組織中TG、Ⅰ型膠原(collagenⅠ)和Ⅲ型膠原(collagenⅢ)等指標(biāo)。
　　2.胰島素耐受實(shí)驗(yàn)(ITT):HFD喂養(yǎng)小鼠第10周時(shí)，禁食6h，腹部打入胰島素(0.66IU/kg)，打的同時(shí)開始計(jì)時(shí)，分別于0、30、60、90、120、150min用血糖針扎尾取血，用血糖儀檢測(cè)血糖值，根據(jù)系列數(shù)據(jù)作ITT曲線，觀察小鼠對(duì)胰島素的耐受情況。
　　3.葡萄糖耐受實(shí)驗(yàn)(GTT):HFD喂

5、養(yǎng)小鼠第11周時(shí)，禁食12h，腹部打入葡萄糖(2g/kg)，打的同時(shí)開始計(jì)時(shí)，分別于0、30、60、90、120、150min用血糖針扎尾取血，檢測(cè)血糖值，根據(jù)系列數(shù)據(jù)作GTT曲線，觀察小鼠對(duì)葡萄糖的控制情況。
　　[結(jié)果]
　　1.體質(zhì)量和肝臟體重比的比較結(jié)果:與WT小鼠相比，F(xiàn)cεR1-/-小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)速度和肝臟體重比均明顯增加。
　　2.肝功能和肝組織纖維化的比較結(jié)果:與WT小鼠相比，F(xiàn)cεR1-/-小鼠血漿A

6、LT和AST水平升高，肝組織collagenⅢ含量增加，collagenⅠ含量無明顯變化，肝組織HE染色提示小鼠肝細(xì)胞腫脹及空泡樣變較重，肝組織masson染色提示肝臟中纖維生成和堆積量增多，且陽性面積比增加。
　　3.脂質(zhì)代謝的比較結(jié)果:與WT小鼠相比，F(xiàn)cεR1-/-小鼠血漿TG和TC水平顯著升高，小鼠肝組織TG堆積量增加，油紅O染色提示肝臟脂質(zhì)堆積程度較重，且陽性面積比增加。
　　4.ITT和GTT的比較結(jié)果:WT和F