CSA對(duì)流產(chǎn)模型鼠和先兆流產(chǎn)患者Th17、IL17mRNA及妊娠結(jié)局的調(diào)控作用研究.pdf

1、目的：研究妊娠早期注射環(huán)孢素A(CSA)對(duì)流產(chǎn)模型小鼠Thl7細(xì)胞及妊娠結(jié)局的作用及白介素-17(IL-17)在早期自然流產(chǎn)發(fā)展中的作用及其臨床意義。
　　方法：構(gòu)建正常妊娠小鼠模型（A組）及自然流產(chǎn)模型（B組），B組再隨機(jī)分為5組，其中B0組為自然流產(chǎn)組，B1-4組為給藥組）。在妊娠第4天給予B1、B2、B3、B4各組孕鼠行單次腹腔注射C S A，劑量分別為1、5、10、15mg/kg，于妊娠第14天取胚胎、外周血及脾臟組織。①

2、計(jì)算各組孕鼠胚胎吸收率；② ELISA法測(cè)定IL-17、IL-6、IL-23在孕鼠外周血血清中的含量；③流式細(xì)胞儀檢測(cè)孕鼠脾臟組織中CD4+IL-17A+/CD4+細(xì)胞比例；④qPCR檢測(cè)孕鼠母胎界面RORyt mRNA的相對(duì)表達(dá)量；采用 ELISA法分別檢測(cè)先兆流產(chǎn)、難免流產(chǎn)、正常妊娠婦女、正常非孕婦女、先兆流產(chǎn)保胎成功后繼續(xù)妊娠婦女及保胎失敗婦女血清中IL-17濃度。采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA)分別測(cè)定先兆流產(chǎn)婦女、難免流產(chǎn)婦

3、女和正常妊娠婦女血清孕酮水平；并采用實(shí)時(shí)PCR(real-time PCR)技術(shù)分別檢測(cè)難免流產(chǎn)和正常妊娠者子宮蛻膜組織中IL-17mRNA的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1、與正常妊娠組相比，自然流產(chǎn)組胚胎吸收率明顯升高（P=0.03)，外周血血清中IL-17、IL-6，IL-23濃度均明顯升高（P均＜0.05)，脾臟組織中CD4+IL-17A+/CD4+細(xì)胞比例明顯升高（P＜0.05)，母胎界面RORyt mRNA表達(dá)量增高顯著（P＜

4、0.01)。
　　2、與自然流產(chǎn)組相比，給藥組胚胎吸收率均有所下降(B2、B3組下降P＜0.05);血清中IL-17、IL-6、IL-23均有不同程度降低；脾臟組織中CD4+IL-17A+/CD4+細(xì)胞比例均有不同程度下降，B2、B3組下降顯著（P＜0.05);孕鼠母胎界面RORyt mRNA表達(dá)量較自然流產(chǎn)組均顯著下降（P值均＜0.05)。
　　3、與正常妊娠組相比，給藥組胚胎吸收率、血清細(xì)胞因子的濃度、脾臟組織中CD4+

5、IL-17A+/CD4+細(xì)胞比例和孕鼠母胎界面RORyt mRNA表達(dá)量均無明顯差異(P均＜0.05)。
　　4、正常妊娠組、正常非孕組、先兆流產(chǎn)組及難免流產(chǎn)組血清中IL-17濃度逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05);相對(duì)于正常妊娠組及正常非孕組，難免流產(chǎn)組血清IL-17濃度顯著升高（P＜0.05)，相對(duì)于先兆流產(chǎn)組，難免流產(chǎn)組IL-17呈上升趨勢(shì)，相對(duì)于正常妊娠組和正常非孕組，先兆流產(chǎn)組血清IL17濃度呈上升趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)差異（P＞0.05);
　　5、難免流產(chǎn)組患者的蛻膜組織中IL-17 mRNA的表達(dá)水平明顯高于正常妊娠組（P＜0.05)；
　　6、正常妊娠組、難免流產(chǎn)組蛻膜組織中IL-17的表達(dá)量和外周血中IL-17濃度存在正相關(guān)性（P=0.049，P=0.034)，且相關(guān)系數(shù)不佳（r=0.499，r=0.475)；
　　7、先兆流產(chǎn)保胎后，繼續(xù)妊娠組血清IL-17含量較治療前下降顯著（P＜0.05);而保胎失敗組患者血清IL-

7、17濃度較治療前有上升趨勢(shì)；
　　8、妊娠患者血清IL-17與血清孕酮水平的相關(guān)性為低度負(fù)相關(guān)（r=一0.498、—0.362、一0.435，P＜0.05)。
　　結(jié)論：①流產(chǎn)可導(dǎo)致T h17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子異常增加。②孕早期腹腔注射 C S A可抑制流產(chǎn)模型小鼠體內(nèi)T h17細(xì)胞的分化和功能，改善妊娠結(jié)局。③CSA對(duì)流產(chǎn)模型小鼠體內(nèi)T h17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子和妊娠結(jié)局的影響并未呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。綜上提示CSA