幕上單側(cè)慢性期腦缺血對側(cè)大、小腦代謝變化的核磁共振波譜研究.pdf

1、背景和目的：
　　腦卒中常導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)急慢性認(rèn)知、情緒及運(yùn)動功能紊亂，嚴(yán)重降低患者的長期生存率。大部分腦卒中患者為大腦動脈的血栓栓塞導(dǎo)致，栓塞區(qū)域血供的快速恢復(fù)對缺血性卒中的治療至關(guān)重要，血流恢復(fù)的再灌注被證實(shí)為最有效的治療措施。然而腦缺血再灌注會導(dǎo)致血腦屏障的破壞、出血性轉(zhuǎn)化、腦組織水腫、神經(jīng)血管損傷和神經(jīng)元死亡等病理改變。另外，腦部損傷（包括腦缺血）不僅局限于原發(fā)部位，還可導(dǎo)致遠(yuǎn)隔區(qū)域神經(jīng)輸入的減少，改變遠(yuǎn)隔腦區(qū)血流、代謝

2、和電生理學(xué)活動或抑制遠(yuǎn)隔腦區(qū)神經(jīng)功能，神經(jīng)機(jī)能聯(lián)系不能現(xiàn)象的提出使更多研究者將遠(yuǎn)隔腦區(qū)作為腦缺血的研究對象。本文主要通過基于離體磁共振質(zhì)子波譜（1H-nuclear magnetic resonance spectroscopy，1H-MRS）的代謝組學(xué)技術(shù)，檢測大鼠腦缺血再灌注慢性期，缺血側(cè)大腦和缺血對側(cè)大腦、缺血對側(cè)小腦的代謝物變化情況，為腦缺血再灌注的長期病理研究及腦缺血患者的長期預(yù)后提供更詳盡的分子生物學(xué)信息。
　　材料與

3、方法：
　　1.選取32只健康成年雄性SD大鼠，體重230-270g，平均（248.5±7.3）g。采用隨機(jī)數(shù)字法將SD大鼠分成兩組：假手術(shù)組（對照組, n=7）和腦缺血再灌注組(ischemia/reperfusion, I/P組，模型組)(n=25)。參照傳統(tǒng)的Longa法建立大鼠右側(cè)大腦缺血再灌注模型，并將術(shù)后24小時Longa評分為1~3分的大鼠納入實(shí)驗(yàn)。
　　2.造模成功后2d、2w和4w，每組隨機(jī)抽取2只大鼠，使

4、用3.0T（Philips Achieva）超導(dǎo)高場磁共振掃描儀及4通道大鼠專用線圈，行頭顱軸位T1加權(quán)成像(T1WI)和T2加權(quán)成像(T2WI)檢查。各組實(shí)驗(yàn)大鼠均在造模成功后2d、2w和4w參照Garcia JH評分法進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分。
　　3.造模成功后4w將實(shí)驗(yàn)大鼠直接斷頭取腦，以液氮速凍缺血側(cè)大腦、缺血對側(cè)大腦和缺血對側(cè)小腦組織，然后保存在-80 oC低溫冰箱中。樣品稱重、萃取、離心及冷凍干燥后行離體1H NMR檢測

5、，采集1H NMR譜圖、預(yù)處理NMR數(shù)據(jù)和識別模式并計(jì)算代謝物相對濃度。
　　4.應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示，兩組比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.最終共12只大鼠成功完成實(shí)驗(yàn)，其中假手術(shù)組6只，模型組6只。雖然實(shí)驗(yàn)大鼠數(shù)量減少，但符合統(tǒng)計(jì)學(xué)樣本數(shù)。
　　2.大鼠造模成功后2天，假手術(shù)組大鼠T1WI、T

6、2WI未見異常信號，模型組大鼠右側(cè)損傷大腦深部核團(tuán)可見異常T1WI低信號、T2WI高信號影，異常信號范圍大小不一致；而且，隨著再灌注時間延長（2天到4周），模型組大鼠右側(cè)大腦異常信號范圍有縮小趨勢。
　　3.假手術(shù)組和模型組大鼠Garcia JH神經(jīng)功能缺損評分比較，隨著再灌注時間延長，大鼠Garcia JH神經(jīng)功能評分逐漸增加。
　　4.與假手術(shù)組右側(cè)大腦相比，模型組大鼠右側(cè)損傷大腦Lac和m-Ins相對濃度顯著升高（P＜

7、0.05），NAA、GABA、Glu等代謝物相對濃度無顯著變化（P＞0.05）。
　　5.與假手術(shù)組相比，模型組缺血對側(cè)小腦和模型組缺血對側(cè)大腦組織 Lac相對濃度顯著升高（P＜0.05），NAA、GABA、Glu等代謝物相對濃度無顯著變化（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.大鼠腦缺血再灌注模型具有不穩(wěn)定性，有待進(jìn)一步改進(jìn)；隨著再灌注時間延長，大腦損傷范圍有縮小趨勢，腦缺血大鼠神經(jīng)功能評分有恢復(fù)趨勢。
　　2