重組人促紅細胞生成素對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響及與自噬的關(guān)系.pdf

1、目的：本課題通過建立大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia reperfusion, I/R)模型，研究重組人促紅細胞生成素（ recombinant human erythropoietin，rhEPO）對大鼠的心臟舒縮功能、血清心肌酶含量、心肌梗死面積、心肌組織中微管相關(guān)蛋白輕鏈3（microtubule associated protein light chain3，LC3）與Beclin1蛋白表達水平以及細胞超微結(jié)構(gòu)的影響，旨在

2、探討rhEPO對大鼠心肌I/R損傷的保護作用及與自噬的關(guān)系，為rhEPO減輕心肌I/R損傷提供新的藥物作用靶點。
　　方法：將80只SD大鼠隨機分為5組：假手術(shù)組（Sham組）、缺血/再灌注組（I/R組）、rhEPO處理組（rhEPO組）、rhEPO+自噬激活劑雷帕霉素(Rapamycin)處理組（rhEPO+Rap組）和雷帕霉素處理組（Rap組）。通過結(jié)扎冠狀動脈構(gòu)建大鼠心肌I/R模型，術(shù)中監(jiān)測心室內(nèi)壓等血流動力學(xué)指標(biāo)；于再灌注

3、后檢測血清肌酸激酶（creatine kinase，CK）和乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）的含量；采用伊文氏藍-TTC法檢測心肌梗死面積；以western blotting法檢測自噬相關(guān)基因LC3、Beclin1的蛋白表達水平；透射電鏡觀察各組心肌細胞內(nèi)自噬泡及超微結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果：與Sham組相比，I/R組、rhEPO組、rhEPO+Rap組、Rap組心臟舒縮功能明顯減弱，血清 CK、LDH含量

4、增高，可見明顯心肌梗死， LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表達上升，透射電鏡下可見心肌細胞內(nèi)肌絲斷裂與自噬泡；與 I/R組相比，rhEPO組、rhEPO+Rap組心臟舒縮功能明顯改善，血清 CK、LDH含量減少，心梗面積縮小， LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表達顯著下降，未見自噬泡；與rhEPO組相比，rhEPO+Rap組及Rap組心臟舒縮功能明顯減弱，血清CK、LDH含量增高，心梗面積增大， LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、Be