促紅細胞生成素對心臟移植大鼠心肌損傷的影響及與PKC通路的關系.pdf

1、目的：
　　研究促紅細胞生成素（EPO）對心臟移植后心肌損傷的影響及其與PKC通路的關系研究。
　　方法：
　　通過同系大鼠心臟移植來建立心肌缺血再灌注損傷模型，實驗分為兩批（5天、10天），每批將SD雄性成年大鼠分成5組：假手術組（A組）；單純心臟移植空白對照組（B組）；心臟移植+EPO治療組（C組）；心臟移植+EPO治療+PKC抑制劑組（D組）；心臟移植+EPO+PKC激動劑組（E組）。第一批術后第5天，第二批術后

2、第10天處死各組大鼠，各組標本進行HE染色，觀察組織細胞結構損害及細胞浸潤程度，采用免疫組織化學法檢測各組心肌組織中EGFR蛋白表達水平，蛋白免疫印跡雜交法（Western Blot）檢測磷酸化PKC及PLC-γ1，特殊試劑盒檢測組織MDA、ATP酶、GSH-Px、鈣離子水平。
　　結果：
　　1. HE染色結果：A組心肌結構完整，排列緊密，無異常改變；B組，5天時的心肌結構排列疏松、炎細胞浸潤明顯、組織有出血，10天時的心

3、肌細胞結構更加紊亂疏松、炎癥浸潤程度顯著、組織出血更明顯，有明顯結構破壞；C組，5天時有少量炎癥細胞浸潤、結構尚完整、有少量組織出血，10天時心肌組織基本趨于正常、結構緊密、無顯著細胞浸潤；D組，5天時心肌結構尚完整、細胞間隙稍增大、有明顯組織出血，10天時心肌結構明顯疏松紊亂、大量炎癥細胞浸潤；E組，5天時心肌組織有少量炎癥細胞浸潤、結構尚完整，10天時心肌組織結構完整緊密，無顯著炎癥細胞浸潤；
　　2.心肌組織MDA水平：（1

4、）5天各組中，A組明顯低于B、C、D、E組（P<0.05）；B組高于C、D、E組（P<0.05）； C組低于D組（P<0.05），高于E組（P<0.05）；（2）10天各組中，A組低于B、D組（P<0.05），A、C、E組三組間比較無明顯統(tǒng)計學差異（P>0.05）；C、E組低于B組（P<0.05），B、D組間無明顯統(tǒng)計學差異（P>0.05）；5天與10天各個對應組，除A組無明顯差異外，其余各組比較均差異明顯，有統(tǒng)計學意義（P﹤0.05）

5、，并且均為10天各組結果低于5天各組；
　　3.各組GSH-Px結果比較：5天時，A組高于B組（P﹤0.05），低于C、D、E組（P﹤0.05）；B組低于C、D、E組（P﹤0.05）；C組高于D但是低于E組（P﹤0.05）；10天各組中，各組GSH-Px表達水平變化和5天各組相似；5天與10天相對應各組比較，除假手術組無明顯差異外，其余各組差異明顯，有統(tǒng)計學意義（P﹤0.05）；
　　4.各組ATP酶變化：兩批結果類似，其中

6、A組低于C、E組（P<0.05），但是高于B組（P<0.05），A、D組之間差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；其中C組高于D組，但是低于E組，具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；
　　5.免疫組化EGFR表達水平比較：5天與10天結果相似，A組低于B、C、D、E組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；B組低于C、D、E組（P<0.05）；C、D、E組相互比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；其中5天與10天相應組比較，除假手術組及單

7、純移植組無明顯差異外，其余各組均具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；
　　6. Western Blot比較PLC-γ1表達差異：5天與10天結果相似，A組低于B、C、D、E組（P<0.05）；B組低于C、D、E組（P<0.05）；C、D、E組相互比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；5天和10天各個對應組比較，除假手術組無差異外，其余均有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；
　　7.心肌組織磷酸化PKC表達水平比較：（1）5天各組中

8、，A組低于C、E組（P<0.05），高于B組（P<0.05），與D組相比無明顯差異（P>0.05）；C組高于D組（P<0.05），而低于E組（P<0.05）；（2）10天各組中，A組低于C、E組（P<0.05），高于D組（P<0.05），與B組比較，無統(tǒng)計學差異（P>0.05）；B組低于C、E組（P<0.05），與D組相比，無統(tǒng)計學差異（P>0.05）；C組高于D組（P<0.05），但是低于E組（P<0.05）；
　　8.心肌組織