重組人促紅細胞生成素對膿毒癥大鼠腎臟的保護作用.pdf

1、目的:
　　 探討重組人促紅細胞生成素(recombinant human erythropoietin rHuEPO)對盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)所致膿毒癥大鼠急性腎損傷的保護作用。
　　 材料與方法:
　　 260只7周齡健康雄性SD大鼠隨機分為:對照組(n=10)，假CLP組(假手術(shù)組，n=50)，CLP組（膿毒癥組，n=50），rHuEPO大劑量組(n=50)、rHuEPO中劑量組(n=50)、rHuEPO

2、小劑量組(n=50)。采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)復(fù)制膿毒癥模型，rHuEPO大、中、小劑量組造模后即刻分別經(jīng)尾靜脈推注rHuEPO5000U/kg、1000U/kg、300U/kg。假CLP組，CLP組，rHuEPO大、中、小劑量組按注藥后2h、6h、12h、24h、36h時點分成5個亞組，各個亞組均10只大鼠，分別在各時點隨機處死大鼠，采用酶聯(lián)免疫法（ELISA法）分析測定血清中腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白細胞介素-6(IL-6)、腎損

3、傷分子-1(KIM-1)、誘導(dǎo)型一氧化氮和酶(iNOS)的水平;免疫組化法檢測大鼠腎組織NF-κB蛋白表達;采用光鏡和透射電鏡觀察腎組織形態(tài)學(xué)變化。
　　 結(jié)果:
　　 膿毒癥組及rHuEPO治療組大鼠CLP術(shù)后6小時均發(fā)生了急性腎損傷改變。
　　 1、腎功能
　　 CLP術(shù)后6h，大鼠血清中Scr、BUN開始升高，24h達最高。與假CLP組相比，CLP組及rHuEPO大、中、小劑量組大鼠血清中Scr、B

4、UN顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與CLP組相比，rHuEPO大、中劑量組大鼠血清中Scr、BUN降低，HuEPO大劑量組與中劑量組相比顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。rHuEPO小劑量組與CLP組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2、各時點大鼠血清中TNF-α、IL-6、KIM-1、iNOS水平的變化
　　 大鼠血清中TNF-α、IL-6、KIM-1、iNOS水平，假CLP組顯著

5、低于CLP組及rHuEPO大、中、小劑量組，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。與CLP組相比，rHuEPO大、中劑量組大鼠血清中TNF-α、IL-6、KIM-1、iNOS的水平均下降，rHuEPO大劑量組與中劑量組相比顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。rHuEPO小劑量組與CLP組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3、術(shù)后24h時腎組織NF-κB的免疫組化檢測結(jié)果
　　 腎組織NF-κB蛋白表

6、達水平，假CLP組水平顯著低于CLP組及rHuEPO大、中、小劑量組，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。與CLP組相比，rHuEPO大劑量組腎組織NF-κB蛋白表達水平顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。rHuEPO中、小劑量組與CLP組相比腎組織NF-κB蛋白表達水平無顯著差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4、光鏡及電鏡觀察腎組織病理學(xué)改變
　　 CLP組表現(xiàn)為腎小球皺縮明顯，腎小管上皮細胞變

7、性，腎小管囊腔擴張，管型形成，腎間質(zhì)大量炎性細胞浸潤;腎小球基底膜部分增厚呈駝峰狀，部分足突細胞融合，部分血管內(nèi)皮細胞增生變厚。rHuEPO大劑量組腎小球及近曲小管病理學(xué)改變均較CLP組輕。
　　 結(jié)論:
　　 1、rHuEPO能夠降低膿毒癥所致急性腎損傷大鼠血清中TNF-α、IL-6、iNOS、KIM-1的水平，發(fā)揮調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、改善腎功能的作用，對膿毒癥所致急性腎損傷具有一定的保護作用，且呈劑量依賴性。