具有互換性和溯源性的酶校準品在臨床酶學標準化應用中的研究.pdf

1、背景：酶學檢測方法的標準化是解決實驗室間結果可比的重要因素，但是由于每個試劑公司在生產試劑時，試劑緩沖液種類選用的不同，緩沖液濃度的不同，以及樣本∕試劑體積比的不同，不同生化分析儀光路系統(tǒng)和流路系統(tǒng)的性能參數不同以及反應槽恒溫設備性能的不同，使得常規(guī)檢測方法之間有差異，常規(guī)檢測系統(tǒng)之間的檢測結果存在明顯差異。并且各試劑生產廠家酶校準品的溯源程度不同，導致產品校準品的溯源性存在很大的差異。最終導致臨床酶學項目檢測結果間可比性差，不同醫(yī)院間

2、結果互認存在困難。為了降低常規(guī)檢測系統(tǒng)之間的檢測結果的差異，為使血清酶定量測定的結果具有可比性，國際臨床化學和實驗室醫(yī)學聯(lián)盟（IFCC）研究并形成多個酶學檢測的參考測量程序。人們探索著如何將參考測量程序的可靠性通過溯源鏈傳遞給臨床常規(guī)檢測系統(tǒng)用戶使用的校準品，常規(guī)實驗室用戶使用具有溯源性的常規(guī)校準品，就可以使患者樣品的檢測結果溯源至參考測量程序，使得患者的檢測結果具有溯源性。但是，如果不認識到校準品還需要具備互換性的話，一致性將無法實現

3、，更無法談及實現溯源性。
　　目的：本課題試圖制備具有良好的溯源性和互換性的血清基質的參考物質，并用具有溯源性和互換性的參考物質作校準品去校準臨床常規(guī)方法，提高各實驗室檢測結果的正確度和實驗室間結果的精密度，進一步提高不同醫(yī)院間結果的一致性和可比性。
　　方法：收集GGT，CK，LDH三個項目乙肝表面抗原( HbsAg)、丙肝抗體(Anti-HCV)、梅毒抗體(Anti-TP)、艾滋（HIVAg/Ab）全陰性混合血清作參考物

4、質，-80℃凍存，驗證混合血清的穩(wěn)定性和互換性，并和國際知名品牌的校準品（如和光校準品和羅氏校準品）進行性能評估。由四家參加國際RELA成績合格的酶學參考實驗室聯(lián)合給參考物質賦值，確保參考物質賦值結果的正確性和溯源性。參考物質作校準品在臨床實驗室應用，參加試驗的11個實驗室先使用各自配套的GGT，CK，LDH校準品校準儀器，在校準通過后，將GGT，CK，LDH高中低3個水平的血清樣本和參考物質各測定3次，記錄檢驗結果；再使用具有溯源性和

5、互換性的參考物質作為校準品校準儀器，在校準通過后重復測定GGT，CK，LDH高中低3個水平的血清樣本和參考物質各3次，記錄檢驗結果。計算11家實驗室在使用具有溯源性和互換性的參考物質作為校準品校準前后，參考物質檢測結果與靶值的偏移和高中低3個水平的血清樣本GGT，CK，LDH檢測結果的變異系數（CV％）。
　　結果：本課題制備的參考物質互換性良好，-80℃凍存一年穩(wěn)定性良好。分別于2014年8月，2014年11月，2015年3月和

6、2015年7月對混合血清GGT，CK和LDH結果進行檢測，結果穩(wěn)定性良好。GGT檢測結果均值為133.88U/L，標準差(SD)為0.63U/L，變異系數(CV)為0.47%；CK檢測結果均值為151.60U/L，標準差(SD)為0.33U/L，變異系數(CV)為0.22%；LDH檢測結果均值為230.63U/L，標準差(SD)為1.31U/L，變異系數(CV)為0.57%。由四家酶學參考實驗室聯(lián)合賦值，實驗室間檢測結果的變異系數較小，

7、賦值合格。GGT參考物質檢測結果均值127.71 U/L，SD0.92 U/L，CV0.72%；CK參考物質檢測結果均值140.79 U/L，SD2.20U/L，CV1.56%；LDH參考物質檢測結果均值226.95 U/L，SD1.52U/L，CV0.67%。參考物質作校準品在臨床實驗室應用，使用了具有溯源性和互換性的參考物質作為校準品校準后， GGT參考物質檢測結果的均值128.08 U/L，檢測結果與靶值的偏移0.30%；CK參考

8、物質檢測結果的均值144.94 U/L，檢測結果與靶值的偏移2.94%；LDH參考物質檢測結果的均值227.49 U/L，檢測結果與靶值的偏移0.23%。使用具有溯源性和互換性的參考物質作為校準品校準后，GGT參考物質檢測結果與靶值的偏移由0.66%降到0.30%，CK參考物質檢測結果與靶值的偏移由4.18%降到2.94%，LDH參考物質檢測結果與靶值的偏移由-4.10%降到0.23%。11家實驗室GGT項目低中高3個水平的血清樣本檢測

9、結果的變異系數（CV）由6.13%，5.90%和6.04%降到了3.30%，1.18%和1.83%；CK項目低中高3個水平的血清樣本檢測結果的變異系數（CV）由3.76%，4.19%和4.96%降到了3.19%，2.61%和2.81%；LDH項目低中高3個水平的血清樣本檢測結果的變異系數（CV）由8.39%，8.74%和8.76降到了1.14%，1.21%和2.73%。
　　結論：本研究收集新鮮混合血清制備參考物質，去除混合血清中

10、的雜質后分裝，驗證混合血清的穩(wěn)定性和互換性，由四家參加國際 RELA成績合格的酶學參考實驗室聯(lián)合賦值，多中心的聯(lián)合賦值可以消除因為一家酶學參考實驗室檢測結果的偏差導致參考物質定值的偏差，四家酶學參考實驗室聯(lián)合賦值保證了參考物質賦值結果的正確性和溯源性。用參考物質或者參考測量程序對常規(guī)檢測系統(tǒng)進行校準是可行的。這種校準方法是用公認的酶參考物質或參考測量程序賦值的參考物質做校準品校準臨床常規(guī)檢測方法，使一種或多種常規(guī)檢測方法的檢測結果與參考