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1、銻(Sb)作為一種重要的重金屬元素,廣泛存在于土壤和水生生態(tài)系統(tǒng)中。雖然銻長(zhǎng)期被用于利什曼原蟲(chóng)病的治療,但是人們并沒(méi)有忽視銻對(duì)于人類的危害(對(duì)心臟和肝臟的損傷等)和對(duì)環(huán)境的污染。中國(guó)是世界上銻資源最為豐富的國(guó)家,也是銻需求量最大的國(guó)家,同時(shí)中國(guó)的銻污染也尤為嚴(yán)重。目前已經(jīng)有報(bào)道許多微生物對(duì)于重金屬銻具有抗性和氧化作用,但是關(guān)于其抗性機(jī)制和氧化機(jī)制的研究非常少。Comamonas testosteroni S44是本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)的一株銻抗性和
2、氧化菌株,C.testosteroni S44對(duì)銻的抗性MIC為300μmol/L,并且能在3天內(nèi)把50μmol的酒石酸銻鉀完全氧化完。微生物蛋白質(zhì)組學(xué)是對(duì)微生物體內(nèi)代謝活動(dòng)相關(guān)的蛋白質(zhì)進(jìn)行研究和鑒定,蛋白質(zhì)組學(xué)研究的高通量特點(diǎn)決定了它能夠深入的闡釋脅迫條件下微生物適應(yīng)環(huán)境多樣性的機(jī)制,因此相當(dāng)一部分微生物蛋白質(zhì)組學(xué)的研究都集中在微生物脅迫生理方面。本實(shí)驗(yàn)首次利用微生物蛋白質(zhì)組學(xué)的方法研究C.testosteroniS44在重金屬銻脅迫
3、下的相關(guān)代謝活動(dòng)。
本文在銻抗性微生物C.testosteroni S44對(duì)銻的抗性機(jī)制的蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,通過(guò)對(duì)雙向電泳結(jié)果分析,選取了87個(gè)表達(dá)量差異在兩倍及以上的蛋白點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,最終成功鑒定出57種蛋白(除去鑒定失敗的和不同點(diǎn)鑒定為同一種蛋白的情況),根據(jù)KEGG功能分類:參與各種類型代謝的蛋白質(zhì)與酶類59%,參與各種遺傳信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白質(zhì)25%,與環(huán)境信息傳遞相關(guān)的蛋白占12%,功能未明確的未分類蛋白4%。通過(guò)結(jié)
4、果分析我們發(fā)現(xiàn):⑴表達(dá)量升高的蛋白占鑒定出總蛋白的63.2%;⑵抗性和應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)量發(fā)生變化以增加對(duì)Sb(Ⅲ)的抵抗能量和減少Sb(Ⅲ)帶來(lái)的對(duì)細(xì)胞組分的破壞;⑶參與糖代謝的蛋白質(zhì)和酶類大部分表達(dá)量都是升高的;⑷蛋白質(zhì)翻譯和氨基酸代謝水平普遍增高;⑸脂肪酸代謝的增強(qiáng)和PHB相關(guān)酶類的表達(dá)量變化表明細(xì)胞內(nèi)能量?jī)?chǔ)存和釋放都增加;⑹與能量相關(guān)蛋白的表達(dá)量變化證明細(xì)胞內(nèi)涉及底物水平磷酸化的酶表達(dá)量上升了,氧化磷酸化的酶表達(dá)量下降了??偟膩?lái)說(shuō)
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