2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  通過制備小鼠肝臟缺血再灌注損傷 miR-370表達(dá)干預(yù)的動物實驗?zāi)P停U明 miR-370表達(dá)抑制和表達(dá)增強(qiáng)對肝臟缺血再灌注損傷和缺血預(yù)處理的作用,揭示 miR-370是否為肝臟缺血再灌注損傷時調(diào)節(jié) TβR2表達(dá)的關(guān)鍵因子,以及miRNA及其對 TGF-β/Smad信號通路的調(diào)控機(jī)制。為肝臟缺血再灌注損傷的防治及保護(hù)提供進(jìn)一步的策略。
  方法:
 ?。?)、小鼠肝臟缺血再灌注損傷 miR-370表達(dá)增強(qiáng)和

2、表達(dá)抑制的動物實驗干預(yù)模型的建立;
 ?。?)、小鼠肝臟缺血再灌注損傷 miR-370表達(dá)干預(yù)的動物實驗?zāi)P徒⒌幕A(chǔ)上,通過組織病理學(xué)石蠟切片 HE染色和血清肝功能酶譜分析探討觀察miR-370表達(dá)變化對小鼠肝臟缺血再灌注損傷及 miR-370表達(dá)變化對小鼠肝臟缺血預(yù)處理的影響;
 ?。?)、小鼠肝臟缺血再灌注損傷 miR-370表達(dá)干預(yù)的動物實驗?zāi)P徒⒌幕A(chǔ)上,采用定時定量 PCR法(real time PCR),免疫

3、組化以及蛋白免疫印跡法(Western blot)等方法在 mRNA水平和蛋白水平觀察 miR-370表達(dá)抑制或增強(qiáng)后,miR-370的靶標(biāo) TβR2的表達(dá)變化情況,進(jìn)一步檢測 TGF-β/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。
  結(jié)果:
  (1)、小鼠肝臟缺血再灌注損傷組中miR-370的表達(dá)水平比假手術(shù)對照組高了2.57倍。同時,肝臟缺血預(yù)處理組的miR-370的表達(dá)水平比缺血再灌注損傷組降低了49.28%(P<0.05,差異有統(tǒng)計

4、學(xué)意義)。
 ?。?)、抑制 miR-370可以減輕肝臟缺血再灌注損傷。在使用 miR-370 mimics后小鼠 miR-370的表達(dá)水平相比基因空白序列對照組提升了,而 miR-370 inhibitor后下降了。miR-370 inhibitor組的血清 ALT酶的水平較基因序列空白對照組降低了37.39%,血清 AST的水平較基因序列空白對照組降低了49.27%(P<0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義)。使用 miR-370 in

5、hibitor后,小鼠的肝臟病理組織學(xué)評分也顯著下降了。相比之下,基因序列空白對照組沒有改善小鼠病理組織學(xué)損傷。
  (3)、抑制 miR-370能夠減輕小鼠肝臟缺血再灌注損傷的促炎癥細(xì)胞因子。肝臟缺血再灌注損傷組和假手術(shù)對照組相比,TNF-a和 IL-β表達(dá)水平明顯上升了。缺血預(yù)處理組和缺血再灌注損傷組相比,TNF-a和 IL-β都有所下降。
 ?。?)、miR-370為肝臟缺血再灌注損傷時調(diào)節(jié) TβR2表達(dá)的關(guān)鍵因子。m

6、iR-370直接靶向調(diào)控3’端非翻譯轉(zhuǎn)換區(qū)轉(zhuǎn)化生長因子βII型受體(transforming growth factor,beta receptor2,TGFBR2或者TβR2)。采用 miR-370 mimics,空白序列對照以及 miR-370 inhibitor轉(zhuǎn)染細(xì)胞,結(jié)果顯示,miR-370 mimics組轉(zhuǎn)染48小時后在 TβR2的mRNA表達(dá)水平下降了。相對的,miR-370 inhibitor組則增加了。同時,miR-3

7、70 inhibitor組和基因序列空白對照組相比 TβR2的mRNA表達(dá)水平增加了。伴隨著 TβR2表達(dá)的增加,其下游靶分子磷酸化 Smad的表達(dá)水平在 miR-370 mimics組比基因序列空白對照組提高了。表明了下調(diào) miR-370可以激活 TGF-β/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。
  結(jié)論:
  miR-370可能是肝臟缺血再灌注損傷損傷和肝臟缺血預(yù)處理保護(hù)機(jī)制中的關(guān)鍵因子之一,miR-370在肝臟缺血再灌注損傷中具有一

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