缺血后處理對(duì)肝臟缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討缺血后處理對(duì)肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制.方法:建立大鼠局部肝臟缺血再灌注模型,將24只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)、缺血再灌注、缺血后處理3組,以缺血再灌前、反復(fù)多次的短暫預(yù)再灌、停灌作后處理.取下腔靜脈血檢測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1 β(IL-1 β)的濃度變化;切取新鮮肝組織,檢測(cè)肝組織中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、髓過氧化物酶(

2、MPO)的活性;采用免疫組化法檢測(cè)肝組織中Bcl-2蛋白含量,末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)己法(TUNEL)檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡狀態(tài),透射電鏡觀察肝組織超微結(jié)構(gòu)的病理形態(tài)學(xué)變化,并用圖象分析儀對(duì)線粒體立體形態(tài)進(jìn)行定量分析.結(jié)果:與缺血再灌注組相比,缺血后處理組中ALT水平和TNF-α、IL-1 β濃度明顯下降(P<0.05),肝組織中MDA、MPO含量亦明顯降低(P<0.05),而SOD活性則顯著升高(P<0.05);同時(shí),經(jīng)

3、缺血后處理后肝組織中肝細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表達(dá)的光密度值則顯著升高(P<0.05),線粒體超微結(jié)構(gòu)和肝組織病理形態(tài)學(xué)損傷亦明顯減輕.結(jié)論:TNF-α、IL-1 β等促炎性細(xì)胞因子介導(dǎo)中性粒細(xì)胞參與肝臟缺血再灌注損傷,缺血后處理可抑制再灌注后氧自由基的過量生成,減少促炎性細(xì)胞因子的釋放,從而拮抗中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)損傷作用;同時(shí),缺血后處理可保護(hù)線粒體的超微結(jié)構(gòu)和功能,并上調(diào)跨線粒體膜Bcl-2蛋白表達(dá)從而抑制