基于UPLC-Q-TOF-MS技術的蜜炙黃芪大鼠體內代謝成分分析.pdf

1、黃芪是傳統(tǒng)補氣藥，臨床上常使用生品和蜜炙品。生品黃芪主要用于益衛(wèi)固表，利水消腫，托毒生肌，蜜炙可加強補中益氣的作用。目前，人們對蜜炙黃芪和黃芪的研究多在體外一種或幾種成分的含量變化上，其臨床療效差異的藥效物質基礎并沒有被闡述；口服藥物入血成分才可能成為起效物質，而藥物起效也可能是代謝物作用結果，研究藥物在體內的吸收代謝更有利于尋找其藥效物質。本課題通過研究黃芪蜜炙前后在大鼠體內的代謝譜及差異，為探尋其臨床療效差異的物質基礎提供實驗依據(jù)。

2、
　　首先采用菲羅門kinetex柱對蜜炙黃芪和黃芪水提物體外成分進行表征，共鑒定了包含16個黃酮類和15個皂苷類化合物在內共39個成分，方法學考察結果表明方法可靠穩(wěn)定，可用于進一步的實驗研究。然后利用UPLC/Q-TOF-MS結合多元統(tǒng)計分析方法(OPLS-DA)對大鼠口服蜜炙黃芪和黃芪水提液后的血清和尿液進行成分分析，共找出66個藥物代謝物和9個藥物原型；代謝物分析結果表明藥物在大鼠體內主要發(fā)生去糖基化、甲基化、去甲基化、羥基

3、化、去羥基化、葡萄糖醛酸化、硫酸化和水解反應；9個體內移行成分包括毛蕊異黃酮苷(calycosin-7-O-β-D-glucoside)、芒柄花苷(ononin)、毛蕊異黃酮(calycosin)、芒柄花素(formononetin)、黃芪甲苷(astragaloside IV)、黃芪皂苷II(astragaloside II)、3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷（(6aR,11aR)-3-Hydro-xy-9,10-dimethoxy

4、pterocarpan）、7,2’-二羥基-3’,4’-二甲氧基異黃烷苷(7,2’-Dihydroxy-3’,4’-dimethoxyisoflavan-7-O-β-D-glucoside)和7,2’-二羥基-3’,4’-二甲氧基異黃烷(7,2’-Dihydroxy-3’,4’-dimethoxyisoflavan)。應用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法(OP LS-DA)分析方法對給藥黃芪蜜炙前后水提物1h后大鼠的血清和24h內

5、的尿液分別進行對比分析，分別找出了17和20個差異代謝物。此外，本課題還利用UPLC/Q-TOF-MS技術測定了血清中主要成分的含量，測定結果表明毛蕊異黃酮苷和芒柄花苷的吸收炙品組明顯高于生品組，從而說明半定量結果是可靠的。
　　以上結果表明，大鼠口服蜜炙黃芪和黃芪水提物后，在體內的吸收代謝存在明顯差異，其中藥物原型毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷和芒柄花素是吸收代謝差異大的成分，推測其與黃芪蜜炙前后臨床療效的差異相關；本課題對