應(yīng)用SELDI-TOF-MS技術(shù)對大鼠急性脊髓.pdf

1、目的：大劑量靜脈使用甲基強的松龍（Methyprednisolone MP）可通過多種機制阻止脊髓繼發(fā)性損傷的發(fā)生，且是目前被明確肯定療效的藥物。但因其應(yīng)用后的大量副作用而逐漸受到質(zhì)疑，加之傷后8h內(nèi)時間窗的嚴格限制，致使63%的患者得不到有效治愈。因此，我們改變給藥途徑，通過蛛網(wǎng)膜下腔即鞘內(nèi)注射MP，應(yīng)用SELDI-TOF-MS技術(shù)分析大鼠急性脊髓損傷后腦脊液不同時間點差異性蛋白質(zhì)譜，尋找腦脊液中明顯變化的差異蛋白，篩選出敏感特異的生

2、物標志物，以進一步探討急性脊髓損傷后的修復(fù)機制，為ASCI治療尋找新的思路及提供白組學方面實驗理論依據(jù)。方法：采用60只SD雄性大鼠，隨機分成2組：大劑量甲基強的松龍（MP）治療組(A組n=30)、小劑量甲基強的松龍（MP）治療組(B組n=30)。采用Allen's法制作SD大鼠急性脊髓損傷模型，脊髓損傷后行鞘內(nèi)注射MP：：大劑量MP（0.075mg/100g）、小劑量MP(0.001mg/100g)，分別于3h、6h、8h、12h提無

3、菌取腦脊液，采用SELDI-TOF-MS技術(shù)檢測A組、B組腦脊液中差異表達的蛋白質(zhì)，獲得腦脊液中的蛋白質(zhì)譜,用ZUCI-PDAS軟件包分析，篩選出各組之間的差異蛋白質(zhì)。結(jié)果：應(yīng)用SELDI技術(shù)對腦脊液中的差異蛋白質(zhì)點進行鑒定，共收集到36個蛋白質(zhì)波峰其質(zhì)/荷比（ratio of mass to change，M/Z）在1000～20000之間被標記，A組、B組之間比較得出4個顯著差異的蛋白質(zhì)峰。結(jié)論：SELDI-TOF-MS是一種新的蛋